[发明专利]一种人体肠道十大优势菌定量检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及微生物生态学领域，具体是一种人体肠道十大优势菌定量检测试剂 盒。

背景技术

构成人体肠道微生态系统的微生物细胞数达10¹⁴个，相当于人自身细胞数量的10倍，它们所携带的基因总数是人体所携带的基因总数的100倍，其最为显著的特征是其结构在一定的时期内的稳定性，并影响着人体消化道的结构和功能，参与营养物质的吸收和代谢等，在维持肠道正常生理功能、调节机体免疫、抵御外来致病菌的侵入等方面发挥重要的作用。已公认肠道生态微的结构和功能的改变与宿主的肥胖，糖尿病、肠易激综合征（IBS）、炎性肠病（IBD）、肠癌等疾病相关。因此，肠道微生态平衡与否，是衡量人体肠道健康与否的标志。肠杆菌(Enterobacter)，该菌科为人体肠道内正常菌群,参与人体的代谢及免疫,但该菌属,尤其是大肠杆菌，很大一部分菌为致病菌或条件致病菌，当人体免疫力低下或细菌侵入肠道以外部位时，也可引起疾病多脂饮食,会造成该菌科条件致病菌菌群增加。肠球菌(Enterococcus)，是人及动物肠道中正常菌群的一部分,它不像乳酸菌一样被认为是安全可靠的，当抗生素大量使用或宿主免疫力低下时，宿主与肠球菌之间的共生状态失衡，肠球菌离开正常寄居部位进入其他组织器官，分泌细胞溶解素、明胶酶等毒力因子侵袭破坏宿主组织细胞，引起宿主的非特异性免疫应答。拟杆菌(Bacterooides)，参与人体多种代谢过程，部分菌株被报道具有条件致病性，易引起机体的机会性感染。该菌可调节营养吸收，粘膜免疫，外源物质代谢，及肠粘膜血管的形成及发育等。双歧杆菌(Bifidobacteria)、乳酸菌(LacticAcidBacteria,LAB)，参与机体多种代谢过程，并产乳酸，为双歧杆菌是有益菌的代表，促进肠道蠕动，改善便秘，减少吲哚，亚硝酸胺等致癌物质产生，促进矿物质及维生素D的吸收和利用等，及增强机体免疫功能。同时可将人体无法吸收的胆固醇转变成粪甾醇，从粪便中排出，具有降血脂的功能等等，为人体健康的晴雨表。奇异菌属(Atopobiumcluster)从葡萄糖主要的发酵产物是乳酸，其他尚有乙酸和甲酸。产丁酸菌(ButyricAcidBacteria,BAB),代表菌：酪酸梭菌(Clostridialclusters，CG1)，柔嫩梭菌(C.leptum)，直肠真杆菌(Eubacteriumrectale)，普拉氏梭杆菌(F.prausnitzii)。丁酸在肠道健康方面起着十分重要的作用，一方面，为肠粘膜细胞的主要能量来源，一方面抑制肠道中的致病菌，保持肠道菌群平衡，从而预防和治疗肠道疾病方面起至决定性作用。如普拉梭菌，为肠道一种抗炎的细菌，有报道称其可以抵消克罗恩病(Crohn'sDisease)患者体内的异常免疫反应对消化道的损伤。同时，它与8种人体的代谢物质有统计相关性，参与宿主多种代谢过程。

发明内容

本发明的目的在于提供一种人体肠道十大优势菌定量检测试剂盒，以解决上述背 景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种人体肠道十大优势菌定量检测试剂盒，包括标本采集管、厚壁管、BufferA、10% SDS、2*SybGreenPCR预混液、标准品、阴性质控品和阳性质控品，所述标本采集管有50支， 规格为500±50mg，内含2ml粪便DAN稳定剂；所述厚壁管有50支，规格为2ml；所述BufferA 有1瓶，规格为500ml，其主要成分为氯化钠和Tris-Hcl；所述10%SDS有一支，规格为10ml， 其主要成分为10%十二烷基硫酸钠；所述2*SybGreenPCR预混液有10份，规格为1200ul/管， 其主要成分为反应缓冲液、SybGreen荧光染料、DNTPs、引物；所述标准品有10支，规格为10¹¹拷贝数/每支，标准品内含人工构建的质粒；所述阴性质控品有2份，规格为500ul/管，其主 要成分为生理盐水；所述阳性质控品有10分，规格为500ul/管，其主要成分为已知拷贝数的 灭活的克隆菌培养液；所述试剂盒在使用时需准备无水乙醇、酚、酚-氯仿-异戊醇、氯仿-异 戊醇以及样本均质器和离心机。

作为本发明进一步的方案：

其使用步骤方法为：

（1）样本采集：