[发明专利]含油酵母变体、其获得方法及其用于脂质生产的用途

权利要求书

1.物种Rhodosporidium azoricum的含油酵母变体，其特征在于具有细胞内脂质累积，其保藏在Leibniz-Institut DSMZ，保藏编号为DSM 29495。

2.根据权利要求1所述的含油酵母变体，其特征为当在富含氮源的培养介质中培养时，以高于或等于其细胞干重的60％的量在细胞内进行脂质累积。

3.根据权利要求2所述的含油酵母变体，其特征为当在富含氮源的培养介质中培养时，以其细胞干重的62％至70％的量在细胞内进行脂质累积。

4.根据权利要求1所述的含油酵母变体，当使用衍生自木质纤维素材料水解得到的底物作为氮源时，以高于或等于其细胞干重的40％的量累积脂质。

5.根据权利要求4所述的含油酵母变体，其中所述的底物为得自芦竹(Arundo donax)的水解产物。

6.根据权利要求4或5所述的含油酵母变体，其中以其细胞干重的45％至60％的量累积脂质。

7.一种用于获得含油酵母变体的方法，所述的方法包括以下步骤：

i.将含油酵母菌株的细胞暴露于诱变剂，从而在基因组DNA中产生随机突变；

ii.将经过所述诱变剂处理的细胞接种于培养介质中并培育，所述的培养介质的特征为存在浓度为20g/L至100g/L的至少一种碳源，并且其中存在至少一种氮源；

iii.将特征为较低密度的所述细胞与细胞培养物的培养介质分离；

其中在所述方法的步骤iii包括以下子步骤：

a)由所述的培养物收集样品，并加入适量的至少一种增稠剂；

b)在低速下离心如此获得的细胞悬液；

c)收集所得离心上清液的较高的级份，以便将特征为较低密度的细胞与所述的细胞培养物的其他部分分离；

d)在培养介质中接种在所述方法的子步骤c)中分离的所述上清液的较高的级份，并培育，其中所述培养介质的特征为存在浓度为20g/L至100g/L的至少一种碳源，并且其中存在至少一种氮源；

e)重复a)至d)的子步骤至少2次；

f)分离单个突变体集落；

其中所述的子步骤a)是通过向所述的培养物样品中添加山梨醇作为增稠剂，达到浓度至多为1M至3M。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述的含油酵母变体选自：亚罗酵母属的物种(Yarrowia spp.),假丝酵母属的物种(Candida spp.),隐球菌属的物种(Cryptococcusspp.),丝孢酵母属的物种(Trichosporon spp.),光滑球拟酵母属的物种(Torulopsisspp.),油脂酵母属的物种(Lipomyces spp.),红酵母属的物种(Rhodotorula spp.)和红冬孢酵母属的物种(Rhodosporidium spp.)。

9.根据权利要求7所述的方法，其中步骤ii中所述的培养介质的特征为存在浓度为30g/L至50g/L的至少一种碳源。

10.根据权利要求7所述的方法，其中步骤ii中所述的至少一种氮源的浓度为3g/L至40g/L。

11.根据权利要求10所述的方法，其中步骤ii中所述的至少一种氮源的浓度为5g/L至20g/L。

12.根据权利要求7所述的方法，其中步骤iii的子步骤d)中所述的培养介质的特征为存在浓度为30g/L至50g/L的至少一种碳源。

13.根据权利要求7所述的方法，其中步骤iii的子步骤d)中所述的至少一种氮源的浓度为3g/L至40g/L。