[发明专利]从生物技术产物中除去DNA的方法有效
| 申请号: | 201580066355.3 | 申请日: | 2015-12-09 |
| 公开(公告)号: | CN107002112B | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
| 发明(设计)人: | B·霍夫;S·哈夫纳;W·K·曾;E·朔尔腾 | 申请(专利权)人: | 巴斯夫欧洲公司 |
| 主分类号: | C12P25/00 | 分类号: | C12P25/00;C12N1/08;C12N1/06 |
| 代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 凌立;黄革生 |
| 地址: | 德国路*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 生物技术 产物 除去 dna 方法 | ||
1.用微生物细胞产生目的产物的方法,包括以下步骤:
a)在培养基中培养能够产生所述目的产物的微生物细胞,其中所述目的产物为维生素,并且所述微生物细胞选自棉花假囊酵母(Eremothecium gossypii)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);
b)通过在45至55℃的温度下温育微生物细胞2至10小时来破裂微生物细胞,从而从细胞释放DNA;
c)在50℃至70℃的温度和2.5-3.0的pH下,温育所释放的DNA,从而降解所释放的DNA;和
d)分离目的产物;
其中在步骤d)中分离的目的产物中不能检测到完整的基因编码序列。
2.根据权利要求1的方法,包括在降解的DNA之前,滗析部分细胞培养基的中间步骤。
3.根据权利要求1或2的方法,其中目的产物是核黄素、维生素B12或泛酸。
4.根据权利要求1或2的方法,其中微生物细胞是棉花假囊酵母细胞且目的产物是维生素B2。
5.根据权利要求1的方法,其中通过在48℃的温度下温育4小时来破裂细胞。
6.根据权利要求1或5的方法,其中在50℃的温度和3.0的pH下,温育所释放的DNA超过2小时。
7.根据权利要求1、2或5的方法,其中温育所释放的DNA 3小时至18小时之间的时间。
8.根据权利要求1、2或5的方法,其中在发酵液中进行步骤(b)的破裂和/或步骤(c)的温育。
9.根据权利要求1、2或5的方法,其中微生物细胞是基因修饰的细胞。
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