[发明专利]阿洛酮糖的制备方法

权利要求书

1.一种阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，包括：

在还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸供给源存在下，果糖及阿洛酮糖的混合物与甘露醇-2-脱氢酶反应来使上述果糖转换为甘露醇的步骤；以及

从上述混合物中分离上述甘露醇的步骤，

使上述果糖转换为甘露醇的步骤利用包含对甘露醇-2-脱氢酶进行编码的基因的微生物来执行。

2.根据权利要求1所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，上述甘露醇-2-脱氢酶为氨基酸序列如序列43所示的来源于假肠膜明串珠菌（ Leuconostoc pseudomesenteroide）ATCC 12291s的甘露醇-2-脱氢酶、氨基酸序列如序列44所示的来源于肠膜明串珠菌（Leuconostocmesenteroides）的甘露醇-2-脱氢酶、氨基酸序列如序列45所示的来源于类球红细菌（Rhodobactersphaeroides）的甘露醇-2-脱氢酶或氨基酸序列如序列46所示的来源于荧光假单胞菌（ Pseudomonas fluorescens ） DSM 50106的甘露醇-2-脱氢酶。

3.根据权利要求1所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，上述还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸供给源为甲酸及甲酸脱氢酶。

4.根据权利要求1所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，上述微生物为棒状杆菌属（Corynebacterium）微生物。

5.根据权利要求1所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，使上述果糖转换为甘露醇的步骤在包含甲酸的培养基中执行，上述微生物还包含对甲酸脱氢酶进行编码的基因。

6.根据权利要求5所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，上述甲酸脱氢酶为氨基酸序列如序列49所示的来源于母牛分枝杆菌（ Mycobacterium vaccae ） 菌苗N10的甲酸脱氢酶。

7.根据权利要求5所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，使上述果糖转换为甘露醇的步骤在包含缓冲溶液的培养基的开放反应系统中执行。

8.根据权利要求1所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，上述微生物还包含对葡萄糖转运蛋白质进行编码的基因。

9.根据权利要求8所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，上述葡萄糖转运蛋白质为氨基酸序列如序列50所示的来源于运动发酵单胞菌（Zymomonas mobilis）的葡萄糖转运蛋白质。

10.根据权利要求1所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，分离上述甘露醇的步骤通过根据溶剂作用下的甘露醇与阿洛酮糖的溶解度差异的甘露醇的结晶化来执行。

11.根据权利要求1所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，还包括如下步骤：使作为底物的果糖与阿洛酮糖-3-差向异构酶发生反应，来制备上述果糖及阿洛酮糖的混合物。

12.根据权利要求11所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，制备上述果糖及阿洛酮糖的混合物的步骤在40℃至90℃的温度下在微生物内执行。

13.根据权利要求1所述的阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，上述甘露醇的分离通过液体色谱法来执行。

14.一种阿洛酮糖和甘露醇的混合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：在还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸供给源存在下，果糖及阿洛酮糖的混合物与甘露醇-2-脱氢酶反应来使上述果糖转换为甘露醇，

使上述果糖转换为甘露醇的步骤利用包含对甘露醇-2-脱氢酶进行编码的基因的微生物来执行。