[发明专利]一种定性检测水稻耐消化淀粉含量的方法有效
申请号: | 201510796098.0 | 申请日: | 2015-11-18 |
公开(公告)号: | CN105349650B | 公开(公告)日: | 2018-09-18 |
发明(设计)人: | 孙健;吴殿星;舒小丽;袁名安;丁一;王寅;张宁 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 定性 检测 水稻 消化 淀粉 含量 方法 | ||
1.一种定性检测水稻耐消化淀粉含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:
以待测水稻的基因组DNA为模板,采用如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的引物对进行PCR扩增,获得扩增产物;扩增产物经限制性内切酶HaeII酶切后进行电泳检测;
所述水稻为籼稻时,若扩增产物包含106bp和473bp两种条带,则说明待测水稻中耐消化淀粉含量高于25%,否则,耐消化淀粉含量低于25%;
所述水稻为粳稻时,若扩增产物包含93bp、106bp和380bp三种条带,则说明待测水稻中耐消化淀粉含量高于25%,否则,耐消化淀粉含量低于25%;
所述耐消化淀粉为缓慢消化淀粉与抗性淀粉之和。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应体系为:基因组DNA50ng,1×PCR buffer 2.0μl,0.2mM dNTPs 1.6μl,0.5μM上游引物0.5μl,0.5μM下游引物0.5μl,Taq酶1U,总体积20μl。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应条件为:94℃预变性5min;94℃变性30s,55℃复性30s,72℃延伸1min,循环30次;72℃延伸7min。
4.一种引物对,其特征在于,所述引物对的上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
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