[发明专利]一种鉴定玉米品种的PCR方法及其应用

权利要求书

1.一种玉米DNA片段的PCR扩增方法，包括如下步骤：对玉米DNA片段进行PCR扩增，得到玉米DNA片段的PCR扩增产物；

所述PCR扩增的反应程序：94℃预变性2min，1个循环；94℃变性2s，60℃退火15s，72℃延伸2s，共35个循环；72℃延伸2min；

所述PCR扩增的引物为如下(1)-(9)中任一种：

(1)为由SEQ ID No.1所示的单链DNA和SEQ ID No.2所示的单链DNA组成的引物对1；

(2)为由SEQ ID No.3所示的单链DNA和SEQ ID No.4所示的单链DNA组成的引物对2；

(3)为由SEQ ID No.5所示的单链DNA和SEQ ID No.6所示的单链DNA组成的引物对3；

(4)为由SEQ ID No.7所示的单链DNA和SEQ ID No.8所示的单链DNA组成的引物对4；

(5)为由SEQ ID No.9所示所示的单链DNA和SEQ ID No.10所示的单链DNA组成的引物对5；

(6)为由SEQ ID No.11所示的单链DNA和SEQ ID No.12所示的单链DNA组成的引物对6；

(7)为由SEQ ID No.15所示的单链DNA和SEQ ID No.16所示的单链DNA组成的引物对8；

(8)为由SEQ ID No.17所示的单链DNA和SEQ ID No.18所示的单链DNA组成的引物对9；

(9)为由SEQ ID No.19所示的单链DNA和SEQ ID No.20所示的单链DNA组成的引物对10；

所述玉米的品种为郑单958和/或先玉335。

2.根据权利要求1所述的PCR扩增方法，其特征在于：所述PCR扩增是在耶拿SpeedCycler 2PCR仪上进行的。

3.权利要求1所述的PCR扩增方法在区别不同玉米品种中的应用。

4.一种区分玉米品种的方法，包括如下步骤：

1)用权利要求1所述的方法中的引物对1、引物对2、引物对3、引物对4、引物对5、引物对6、引物对8、引物对9和引物对10分别对待测玉米A和待测玉米B分别进行PCR扩增，得到待测玉米A的9种PCR扩增产物和待测玉米B的9种PCR扩增产物；

所述PCR扩增的反应程序：94℃预变性2min，1个循环；94℃变性2s，60℃退火15s，72℃延伸2s，共35个循环；72℃延伸2min；

2)检测所述待测玉米A的9种PCR扩增产物和所述待测玉米B的9种PCR扩增产物，比对所述待测玉米A和所述待测玉米B的9种PCR扩增产物来区分玉米品种；

所述待测玉米A为郑单958；所述待测玉米B为先玉335。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增是在耶拿SpeedCycler 2PCR仪上进行的。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：2)为电泳检测所述待测玉米A的9种PCR扩增产物和所述待测玉米B的9种PCR扩增产物，比对所述待测玉米A和所述待测玉米B的电泳图谱来区分玉米品种。