[发明专利]用于果汁中脂环酸芽孢杆菌PCR检测的引物及其应用在审
| 申请号： | 201510422771.4 | 申请日： | 2015-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN105154523A | 公开（公告）日： | 2015-12-16 |
| 发明（设计）人： | 王周利;蔡瑞;岳田利;袁亚宏 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人： | 李郑建;孙雅静 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 果汁 中脂环酸 芽孢 杆菌 pcr 检测 引物 及其 应用 | ||
1.一种用于果汁中脂环酸芽孢杆菌PCR检测的引物，其特征在于，该引物根据脂环酸芽孢杆菌16SrDNA基因序列的保守区域设计获得，该引物包括上游引物序列SEQIDNO.1和下游引物序列SEQIDNO.2；
所述的上游引物序列SEQIDNO.1为5’-ATGCGTAGATATGTGGAGGA-3’；
所述的下游引物序列SEQIDNO.2为5’-CAGGCGGAGTGCTTATTG-3’。
2.权利要求1所述的引物在果汁中脂环酸芽孢杆菌PCR检测中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的果汁中脂环酸芽孢杆菌PCR检测为果汁中脂环酸芽孢杆菌的SYBRGreenI荧光定量PCR检测。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，检测方法包括采用免疫磁性分离技术进行果汁样品的预处理，然后利用权利要求1中的引物进行果汁样品中脂环酸芽孢杆菌的SYBRGreenI荧光定量PCR检测。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的SYBRGreenI荧光定量PCR检测方法的模板为脂环酸芽孢杆菌样品总DNA，SYBRGreenI荧光定量PCR检测方法的反应体系包括无菌超纯水、SYBRGreenIPremixEx-TaqTM、上游引物序列SEQIDNO.1、下游引物序列SEQIDNO.2和脂环酸芽孢杆菌样品总DNA。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的反应体系包括12.5μL的SYBRGreenIPremixEx-TaqTM、0.5μL的浓度为10μM上游引物SEQIDNO.1、0.5μL的浓度为10μM下游引物SEQIDNO.2、1.0μL的脂环酸芽孢杆菌样品总DNA和10.5μL的无菌超纯水。
7.一种用于果汁中脂环酸芽孢杆菌PCR检测的试剂盒，其特征在于，该试剂盒中含有权利要求1所述的上游引物序列SEQIDNO.1和下游引物序列SEQIDNO.2。
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