[发明专利]鸭甲肝病毒1型和3型二重二温式RT-PCR检测试剂盒有效
| 申请号： | 201510322869.2 | 申请日： | 2015-06-12 |
| 公开（公告）号： | CN104862425B | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | 谢芝勋;赵虹;谢丽基;刘加波;罗思思;谢志勤;邓显文;黄莉;黄娇玲;曾婷婷 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广西南宁公平知识产权代理有限公司 45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530001 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甲肝 病毒 二重 二温式 rt pcr 检测 试剂盒 | ||
1.鸭甲肝病毒1型和3型二重二温式RT-PCR检测引物组，其特征在于包括两对特异性引物，分别是引物1和2、引物3和4，它们分别为序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的碱基序列，所述引物1、引物2、引物3、引物4的摩尔比为0.5-1∶0.5-1∶1∶1。
2.根据权利要求1所述的鸭甲肝病毒1型和3型二重二温式RT-PCR检测引物组，其特征在于：所述引物1、引物2、引物3、引物4的摩尔比为1∶1∶1∶1。
3.权利要求1所述鸭甲肝病毒1型和3型二重二温式RT-PCR检测引物组在PCR扩增方面的非诊断应用，其特征在于：所述PCR扩增的退火温度为60.0-70.0℃。
4.根据权利要求3所述的非诊断应用，其特征在于：所述PCR扩增的退火温度为65℃。
5.一种鸭甲肝病毒1型和3型二重二温式RT-PCR检测试剂盒，其特征在于该试剂盒含有以下试剂：
A液：PCR反应液，含2×Taq PCR Mix、DHAV-1上下游引物、DHAV-3上下游引物、ddH2O，DHAV-1上下游引物分别是引物1和2，DHAV-3上下游引物分别是引物3和4，引物1至4分别为序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的碱基序列；所述引物1、引物2、引物3、引物4的摩尔比为0.5-1∶0.5-1∶1∶1；
B液：DHAV-1+DHAV-3模板，作为阳性对照；
C液：ddH2O，作为阴性对照。
6.根据权利要求5所述的鸭甲肝病毒1型和3型二重二温式RT-PCR检测试剂盒，其特征在于：所述PCR反应液含2×Taq PCR Mix 12.5μL、DHAV-1上下游引物各0.5μl、DHAV-3上下游引物各0.5μl、ddH2O 7.5μL，其中各引物浓度均为25μmol/mL；所述B液含DHAV-1+DHAV-3模板共3μL，所述C液为2μL ddH2O。
7.权利要求6所述鸭甲肝病毒1型和3型二重二温式RT-PCR检测试剂盒在PCR扩增方面的非诊断应用，其特征在于：所述PCR扩增的退火温度为50.0-60.1℃。
8.根据权利要求7所述的非诊断应用，其特征在于：所述PCR扩增的退火温度为65℃。
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