[发明专利]互叶白千层总黄酮的制备及其检测方法

权利要求书

1.一种互叶白千层总黄酮的制备方法，其特征在于：所述的互叶白千层总黄酮的制备方法步骤如下：

（1）乙醇加热回流提取：①取经水蒸气蒸馏法提取精油后的互叶白千层茎叶，按质量每800-1200 g互叶白千层茎叶加入8～15升浓度为50～95%的乙醇 ；②加热回流提取3次，每次1～3小时，过滤，合并滤液；③减压回收乙醇，并浓缩至无醇味，加水稀释至总黄酮浓度为0.2～0.8 mg/mL 的互叶白千层提取液，离心取上清液，待用；

（2）大孔吸附树脂分离纯化：①选择大孔吸附树脂； ②吸附：上柱互叶白千层提取液中总黄酮浓度为0.2～0.8 mg/mL，上柱互叶白千层提取液体积为填充大孔吸附树脂体积的2～5 倍，上柱流速为 0.5～3 BV/h；③洗脱：洗脱剂为50～80%乙醇，洗脱剂用量为填充大孔吸附树脂体积的 2～5 倍，洗脱流速为2～5BV/h；收集 2～5倍洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，60℃真空干燥，即得互叶白千层总黄酮提取物；

所述的大孔吸附树脂为X-5或 AB-8大孔吸附树脂；

所述的互叶白千层总黄酮，该总黄酮含量以芦丁计算不少于 50.0%；

所述的互叶白千层总黄酮的制备方法，得到的互叶白千层总黄酮用以下步骤进行检测：

（1）对照品储备液的制备：精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.20mg芦丁的溶液，即得芦丁对照品储备液 ；

（2）标准曲线的制备：精密量吸取芦丁对照品储备液 0.5、1、2、3、4、5 mL，分别置于10mL 容量瓶中，分别加入质量分数为5%的NaNO2 溶液 0.5mL，摇匀放置8 min后，分别加入质量分数为10%的Al(NO3)3 溶液0.5 mL，摇匀放置8min，再分别加入质量分数为4% 的NaOH溶液 4.0mL，加甲醇稀释至刻度， 摇匀放置 l5min 后，在498±2nm 波长处测定溶液的吸光度值 A，同时进行空白对照；以浓度（μg/mL）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标绘制标准曲线；

（3）测定法：取制备得到的互叶白千层总黄酮提取物约 20mg，精密称定，置100 mL量

瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取 2mL，置 10mL 量瓶中，加入质量分数为10% 的Al(NO3)3溶液 0.5 mL，摇匀放置8 min， 再分别加入质量分数为4%的NaOH溶液 4.0 mL，加甲醇稀释至刻度，摇匀放置l5min 后，在498±2nm 波长处测定溶液的吸光度值 A，同时进行空白对照；本品总黄酮含量以芦丁计算不少于 50.0%。

2.权利要求1所述的互叶白千层总黄酮，其特征在于：该总黄酮应用在制备抗炎、镇痛、抑菌、抗过敏、抗氧化的药物中。