[发明专利]一种鸡胚病毒液病毒效价的测定方法有效

专利信息
申请号: 201510207883.8 申请日: 2015-04-28
公开(公告)号: CN104774973B 公开(公告)日: 2017-08-25
发明(设计)人: 江兴华;陆奕滨 申请(专利权)人: 福州大北农生物技术有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/02;C12R1/93
代理公司: 福州君诚知识产权代理有限公司35211 代理人: 戴雨君
地址: 350000 福建省*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 鸡胚病 毒液 病毒 测定 方法
【权利要求书】:

1.一种鸡胚病毒液病毒效价的测定方法,其特征在于:其包括以下步骤:

1) 鸡胚接种部位的确定:选择鸡胚侧,鸡胚脐带周围,避开大血管的部位,画直径2-3mm的圆圈作为接种部位;

2) 样品的稀释:取新城疫鸡胚病毒液,用生理盐水逐步稀释,得到不同稀释度的新城疫鸡胚病毒液稀释液;

3) 接种:用注射器吸取10-7、10-8、10-9三个稀释度的新城疫新城疫鸡胚病毒液稀释液,每个稀释度接种5枚10日龄鸡胚,每胚0.1ml;

4) 封孔:用速凝胶水将上述接种后的鸡胚的接种部位封住;

5) 鸡胚后孵化及鸡胚的收获冷蛋:将接种封孔后的鸡胚置36-37℃的恒温恒湿培养箱中培养,每24h照蛋1-2次,48h以前死亡的鸡胚弃去不计,在48-120h死亡的鸡胚随时取出,直立蛋盘,置2-8℃冷却120h,将所有的活胚收取置20℃的温箱中1h,然后再移至15℃的温箱中1h,然后再将活胚移至2-8℃的冷库中冷却4-24h,等待测红细胞凝集价;

6)鸡胚红细胞凝集价的测定及EID50的计算:同一稀释度死亡的鸡胚等量收集胚液于同一试管中,活鸡胚单个收集胚液,分别测红细胞凝集价,胚液凝集价≥1:160者判为感染,计算病毒效价EID50

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