[发明专利]一种携带抗稻瘟病基因Pi65(t)水稻新品种的分子育种方法有效
| 申请号： | 201510176722.7 | 申请日： | 2015-04-10 |
| 公开（公告）号： | CN104774945B | 公开（公告）日： | 2017-10-03 |
| 发明（设计）人： | 郑文静;陆晓春;赵家铭;张丽霞;马作斌;丛玲;王平;白春明;朱振兴;王春语;李丹;李金红;于惠琳;王妍 | 申请（专利权）人： | 辽宁省农业科学院;郑文静;陆晓春 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11;A01H1/02;A01H1/04 |
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| 地址： | 110161*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 携带 稻瘟病 基因 pi65 水稻 新品种 分子 育种 方法 | ||
1.一种用于检测水稻抗稻瘟病基因Pi65(t)是否存在的分子标记的引物对，如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。
2.一种检测水稻亲本中是否存在抗稻瘟病基因Pi65(t)的方法，以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示序列为引物，扩增待检测基因组DNA，6％非变性聚丙烯酰胺电泳分离，只获得片段长度为139bp扩增子的即为含有抗稻瘟病基因Pi65(t)。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，扩增子包含长度分别为139bp及120bp两条片段的水稻亲本即为不含有水稻抗稻瘟病基因Pi65(t)而含有其感病等位基因。
4.一种检测水稻杂交后代DNA中是否存在纯合抗稻瘟病基因Pi65(t)的方法，以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示序列为引物，扩增待检测基因组DNA，6％非变性聚丙烯酰胺电泳分离，只获得片段长度为139bp扩增子的即为含有纯合抗稻瘟病基因Pi65(t)。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，扩增子包含长度分别为139bp及120bp两条片段的水稻杂交后代即为不含有纯合抗稻瘟病基因Pi65(t)而含有其感病等位基因或杂合抗稻瘟病基因Pi65(t)。
6.一种携带抗稻瘟病基因Pi65(t)水稻新品种的分子育种方法，以港育129为父本，与其他水稻品种杂交，F1代与该品种回交，获BC1F1，取BC1F1单核靠边期花药进行小孢子培养，获得再生植株，提取各植株DNA，以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2为引物进行PCR扩增，6％非变性聚丙烯酰胺电泳分离，只获得片段长度为139bp扩增子的对应个体即为含有纯合抗稻瘟病基因Pi65(t)的品系。
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