[发明专利]用于大分子的增强的递送的方法和组合物

说明书

本申请是申请号为200980126247.5的中国专利申请的分案申请。

本申请要求2008年7月10日提交的美国临时申请案61/079586(其内容通过引用合并入本文)的优先权。

发明领域

本公开内容涉及促进分子穿过生物膜的递送，特别是结合抗原的多肽穿过血脑屏障进入中枢神经系统(CNS)的递送的组合物和方法。

发明背景

根据2006年世界卫生组织的报告，世界上超过10亿人患有神经病症，并且此类病症每年导致将近680万人死亡。治疗性结合抗原的肽例如抗体可用于治疗多种(如果不是大部分的话)此类神经病症。然而，使用此类治疗性结合抗原的肽治疗神经病症经常受到与递送药物穿过血脑屏障(BBB)相关的困难的阻碍。

虽然已发现增强分子穿过上皮细胞层的递送的化合物，但通常显示其只在增强小分子的递送中有效。例如，已显示肽4-苯基偶氮苄基氧羰基-Pro-Leu-Gly-Pro增强小分子穿过上皮细胞层的运输，然而对于10kDa或更大的大分子未显示渗透增强作用(参见美国专利5,534,496；Yen等人1995,J Control Release,36:25-37)。尽管进行了大量研究，但目前还没有将治疗性结合抗原的多肽递送至CNS内的方便有效的方法。

因此，在本领域内存在对增强治疗性结合抗原的多肽穿过上皮层特别地至CNS的特异性递送以治疗CNS病症的组合物和方法的持续需要。

发明概述

本发明至少部分基于令人惊讶的发现：渗透增强剂(例如，Pz-肽或FMOC-肽)能够增强大的大分子(即，大于10kDa)例如结合抗原的多肽(例如scFv)至CNS的特异性递送，特别是当给鼻粘膜施用时。因此，本发明提供了增强大的大分子(即，大于10kDa)例如结合抗原的多肽(例如，scFv)穿过上皮层的递送的组合物和方法。此类方法和组合物是特别有利的，因为它们使得能够通过鼻内施用方便、有效和选择性地将结合抗原的多肽(例如scFv)递送至CNS以治疗神经病症。

在一个方面，本发明提供了包含一种或多种结合抗原的多肽例如免疫结合剂(例如,scFv)和一种或多种渗透增强剂(例如，Pz-肽或FMOC-肽)的组合物。在特定的实施方案中，将结合抗原的多肽共价连接至渗透增强剂。

在某些实施方案中，结合抗原的多肽特异性结合靶抗原特别是TNFα，所述靶抗原选自TNF-α、β淀粉样蛋白、β淀粉样蛋白衍生的可扩散配体受体、单胺氧化酶-B、L-3,4-二羟苯丙氨酸脱羧酶、乙酰辅酶A羧化酶、N-甲基-D-天冬氨酸受体(也称为GRIN1)、GRINA、GRIN2A、GRIN2B、GRIN2C、GRIN2D、GRIN3A、GRIN3B、组胺H1受体、毒蕈碱受体(也称为CHRM1)、CHRM2、CHRM3、CHRM4、下丘泌素受体1、下丘泌素受体2、5-羟色胺(也称为HTRlA)、多巴胺受体(也称为DRD1)、DRD2、DRD3、DRD4、DRD5、肾上腺素能β1受体、去甲肾上腺素转运蛋白(NET)和多巴胺D2受体。

在其他实施方案中，结合抗原的多肽是包含与本文的表5、6和7中所示的一个或多个氨基酸序列具有至少80％，优选85％、90％、95％或99％的同一性或相似性的氨基酸序列的scFv。

在其他实施方案中，渗透增强剂促进结合抗原的多肽至中枢神经系统的选择性鼻内递送。

本发明的组合物特别地可用作药物(或用于制造药物)，所述药物特别地用于治疗、预防或延迟神经病症的进展，所述神经病症包括但不限于偏头痛、抑郁症、阿尔茨海默氏病、帕金森病、精神分裂症、癫痫、中风、脑膜炎、肌萎缩侧索硬化、失眠(insomnia)、脑膜炎、记忆缺陷(memory impairment)、多发性硬化、发作性睡病、中风、创伤性脑损伤和应激(stress)。

在另一个方面，本发明提供了包括一种或多种结合抗原的多肽(例如scFv)、一种或多种渗透增强剂(例如，Pz-肽或FMOC-肽)以及使用说明书的试剂盒。

附图概述

当结合下列附图阅读下列详述时，将更好地理解本公开内容的特征和有利方面，其中：

图1描述了时程实验，其跟踪在鼻内施用400μg scFv后(A)嗅球、(B)大脑、(C)小脑和(D)脑干中的ESBA105浓度。