[发明专利]壁虎蛆虫蛋白质的制备方法及其在制备抗子宫肌瘤药品中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种药物的制备方法及其新用途，尤其是壁虎蛆虫蛋白质的制备方法及其在制备抗子宫肌瘤药品中的应用。

背景技术

子宫肌瘤又称子宫平滑肌瘤，是女性生殖器常见的一种良性肿瘤，大部分无症状，少数患者表现为阴道出血、月经失调、白带增多等症状。

现常用的治疗方法有：药物治疗、宫腹腔镜手术切除、肿瘤剥除术等，但手术治疗带来的副作用较多。

CN102370851A公开了治疗子宫肌瘤调经的中草药，由丹参、当归、红花、月季花、鸡冠花、穿山甲、菊花、凤尾草、夏枯草等12味中草药组成；CN102319392A公开了一种治疗子宫肌瘤的中药滴丸剂及其制备方法，由牡蛎、香附、三棱、莪术、白花蛇舌草等中草药组成；CN102327531A公开了一种有效治疗子宫肌瘤的中成药及中药汤剂，由当归、桃仁、莪术、香附、王不留行、三棱等12味中草药组成；CN102247581A公开了一种治疗子宫肌瘤的药物，由香附、当归、川穹、桃仁、三棱、丹参、元参、丹皮、甘草等15种中草药粉碎而成；CN102302649A公开了一种治疗子宫肌瘤的中药组合物，由黄药子、黄麻子、南瓜藤、化橘红、茴香根、藕节等组成。

现有治疗方法中，有采用桂枝茯苓胶囊联合米非司酮治疗子宫肌瘤取得了一定疗效，也有采用《济坐方》中香棱丸加味治疗子宫肌瘤的；也有的医师自拟四合克瘤方治疗子宫肌瘤取得了一定疗效；药物治疗有用米非司酮、达那唑、他莫昔芬雄性激素及促性腺激素。

201210315707.2公开了人工培殖壁虎蛆虫的工艺，本发明描述了以壁虎等为原料，经培殖、培养、后处理制备成为壁虎蛆虫。本发明过程重组壁虎基因，生成的壁虎蛆虫成分具有抗子宫肌瘤的功能，可以批量生产。

原则上，上述的几种中药制剂都可以用于治疗子宫肌瘤药品的制备。但是，由于前述的几个药方中药材繁多，每种中草药由于种植地域、气候、品种、采收时间、炮制及加工方法的差异，因此，在工业化生产中难于保证产品的一致性，也难于控制产品的质量。

发明内容

本发明的目的是提供一种壁虎蛆虫蛋白质的制备方法及其在制备抗子宫肌瘤药品中的应用，利用壁虎蛆虫为原料，经过分离纯化蛋白质，再用此蛋白质制备各种剂型的药品，本过程工艺简要明了，药品成分明确，一致性好，疗效明显。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

（1）将1000g壁虎蛆虫在常温膨化装置（200520108339.X）中常温条件下膨化粉碎。

本步骤中，所述膨化压力为0.1~5MPa，时间为10~60min。

（2）膨化粉碎后的物料加入到膨胀溶剂体系提取装置（201210179076.6）中，加入膨胀溶剂并加压至2~10MPa，形成膨胀溶剂体系，提取出壁虎蛆虫蛋白质粗品。

本步骤中，所述膨胀溶剂由1~10Kg液态二氧化碳、100~500mL甲醇及100~300gNH₃·H₂O组成或由1~10Kg液态二氧化碳、100~500mL乙醇及100~300g氯化铵组成。

本步骤中，所述提取温度为10~20℃，时间为10~30min。

（3）收集含有壁虎蛆虫蛋白质粗品的溶液并且用微孔过滤器过滤去掉杂质。

本步骤中，所述微孔过滤器的孔径为0.5~50μm。

（4）用超滤机超滤处理，收集含有相应分子量的壁虎蛆虫蛋白质超滤溶液。

本步骤中，所述超滤机的孔径为50~100nm。

（5）超滤液溶解在适宜的溶剂中用固相萃取柱分离，收集洗脱成分。

本步骤中，所述溶剂为乙腈。

（6）将洗脱成分溶解在合适的溶剂体系中，用超声驻波液相制备色谱（200920274485.8）分离纯化。

本步骤中，所述溶剂体系由正丁醇-乙酸乙酯-水（体积比1.25:3.75:5）组成或4.5%聚乙二醇-7%葡聚糖T500（重量比）组成。

（7）纯化后的壁虎蛆虫蛋白质用真空冷冻干燥机制备成冻干蛋白粉。

本步骤中，所述真空冷冻干燥温度为-30~50℃、时间为18~26h。

（8）赋予不同的药用辅助材料，分别制备成注射剂、口服剂、栓剂，可用于制备抗子宫肌瘤药品。