[发明专利]一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物纺织技术领域，特别涉及一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法。

背景技术

麻是纺织原料之一，其品种主要有亚麻、苎麻、大麻、红麻、黄麻、罗布麻、剑麻、蕉麻、荨麻和苘麻等。苎麻是我国特有的麻类资源，被称为“中国草”，我国是世界上的主要苎麻生产国，苎麻产量占世界总产量90％以上；亚麻纤维俗称“纤维皇后”，是世界上最古老的纺织纤维，制成的织物用途很广泛。大麻纤维也是人类最早利用的纺织纤维之一，我国大麻产量居世界首位。作为绿色生态纤维，麻纤维具有吸湿、透气、抑菌、防霉、抗紫外线、无静电等优良性能，所制成的纺织品具有透气凉爽、抑菌防腐等特性。在国家节能减排政策和消费者回归自然、追求绿色的消费观念推动下，麻类纤维绿色加工技术已经成为纺织领域的研究热点。

麻纤维种类繁多，它们由不同比重的纤维素、半纤维素、木质素、果胶和杂质组成，纺织加工中，必须经过“脱胶”，亚麻脱胶又称亚麻粗纱煮炼，即去除果胶、半纤维素和木质素等非纤维素物质(统称为胶质)，才能获得用于轻纺的纤维，实现其使用价值。常用的微生物脱胶是利用微生物以麻纤维中的胶质为其碳素、氮素营养来源的特性，将麻纤维中的果胶、半纤维素、木质素等物质分解转化为简单的低分子物质，从中得到本身生命活动所需的营养物质和热能，从而完成麻纤维的脱胶过程。通过采集菌样，再进行富集培养，分离纯化，在适宜的培养基及培养条件下可以培养出健壮而又有较强生命力的菌种，然后接种到需脱胶的原麻上进行脱胶。

工业中普遍使用的化学脱胶方法需经4-6次水洗，生产一吨精干麻通常需要500-700吨水，而且生产中工作不连续、劳动强度大、脱胶工艺时间长，能耗高，脱胶质量影响织物外观。更不能适应高档、高支织物需要。为了去除更多胶质，提高脱胶效率，方便后道工序加工，工业选择了化学方法和细菌联合对亚麻煮练，此法联合处理麻是生产优质纤维的加工工艺，其过程中的菌种选择和加双氧水的工艺是脱胶的关键。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，该方法采用的菌株生长周期短，菌种不易被污染，处理成本低，脱胶条件温和；脱胶方法流程简单，时间缩短，能耗减少，排污量减少，有利环境保护。

本发明的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，包括：

(1)将热带假丝酵母DK2菌株保存于PDA培养基培养，添加冻存缓冲液；经由PDA斜面培养基转接入装有基础液体培养基的三角瓶中，接入所得的菌一环，在摇床中25～30℃恒温震荡培养3～4d后，培养基接种入亚麻发酵培养基(亚麻发酵培养基的组成为？)，摇瓶培养得到发酵菌液，发酵菌液经过滤得到菌丝体，菌丝体用无菌水洗净打散，随后收集于无菌水中制成菌丝悬浮液，保存备用；

(2)在基础液体培养基中分别加入1～2％w/v的天然底物和不同浓度的CuSO₄·5H₂O作为产酶培养基，在三角瓶中装入产酶培养基，接入上述菌丝悬浮液，在摇床中25～30℃恒温震荡培养，培养过程中定时提取发酵液，离心后取上清液即为粗酶液；

(3)将灭菌后的麻类原料与上述粗酶液和双氧水的混合液按质量体积比1:10～30混合，调节pH值，然后放在摇床中进行处理，最后加入氢氧化钠，并升高温度进行脱胶，除去脱胶液，冲洗，当pH值为自然时，停止冲洗，完成脱胶。

所述步骤(1)中的热带假丝酵母DK2菌株的ITS序列如SEQ ID NO:1所示。

根据ITS测序Blast及聚类分析结果，该菌与热带假丝酵母菌相似性为99％，结合生理生化试验结果和镜检分析，命名此菌株为热带假丝酵母(Candida tropicalis)DK2菌株。ITS测序中，所采用的正向引物为：ITS1(5-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’)、反向引物为ITS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)，均为国际通用引物，由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。

本发明所采用的热带假丝酵母(Candida tropicalis)DK2菌株，保藏单位名称：CGMCC中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏号为CGMCC NO.10186，保藏日期为2014年12月15日。建议分类命名为：热带假丝酵母(Candida tropicalis)。