[发明专利]一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法

权利要求书

1.一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，包括：

(1)将热带假丝酵母DK2菌株保存于PDA培养基培养，添加冻存缓冲液；经由PDA斜面培养基转接入装有基础液体培养基的三角瓶中，接入所得的菌一环，在摇床中25～30℃恒温震荡培养3～4d后，培养基接种入亚麻发酵培养基，摇瓶培养得到发酵菌液，发酵菌液经过滤得到菌丝体，菌丝体用无菌水洗净打散，随后收集于无菌水中制成菌丝悬浮液，保存备用；

(2)在基础液体培养基中分别加入1～2％w/v的天然底物和不同浓度的CuSO₄·5H₂O作为产酶培养基，在三角瓶中装入产酶培养基，接入上述菌丝悬浮液，在摇床中25～30℃恒温震荡培养，培养过程中定时提取发酵液，离心后取上清液即为粗酶液；

(3)将灭菌后的麻类原料与上述粗酶液和双氧水的混合液按质量体积比1:10～30混合，调节pH值，然后放在摇床中进行处理，最后加入氢氧化钠，并升高温度进行脱胶，除去脱胶液，冲洗，当pH值为自然时，停止冲洗，完成脱胶。

2.根据权利要求1所述的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，其特征在于：所述步骤(1)中的热带假丝酵母DK2菌株的ITS序列如SEQ ID NO:1所示。

3.根据权利要求1所述的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，其特征在于：所述步骤(1)中的冻存缓冲液每100ml的配方为：磷酸二氢钾0.1g，磷酸氢二钾0.02g，柠檬酸钠0.06g，七水合硫酸镁0.03g，甘油12ml，加水定容至100ml，制得。

4.根据权利要求1所述的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，其特征在于：所述步骤(1)中的基础液体培养基的组成为：马铃薯200g，葡萄糖20g，蒸馏水1000mL，pH自然；亚麻发酵培养基的组成为：每1000ml培养基包括亚麻皮200g，麸皮50g，麦芽汁50ml和水950ml。

5.根据权利要求1所述的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，其特征在于：所述步骤(1)中的保存温度为40℃。

6.根据权利要求1所述的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，其特征在于：所述步骤(2)中的天然底物为茶叶、稻草、麦草、花生壳、豆粕、蔗渣、桔皮、玉米杆或麦鼓；CuSO₄·5H₂O的浓度范围为0-4mM。

7.根据权利要求1所述的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，其特征在于：所述步骤(2)中的产酶培养基的组成为：NaNO₃2.5g，KH₂PO₄1g，CaCl₂·6H₂O0.1g，MgSO₄0.3g，NaCl 0.1g，FeCl₃0.01g，油菜秸秆粉0.5g，蒸馏水1000mL，pH用稀盐酸调至6.0-7.0。

8.根据权利要求1所述的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，其特征在于：所述步骤(3)中的麻类原料为亚麻、苎麻、黄麻、红麻或竹的原茎、纤维、纱线或织物。

9.根据权利要求1所述的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，其特征在于：所述步骤(3)中的粗酶液和双氧水之间的体积比为1:10；所述调节pH值至4.0-7.0。

10.根据权利要求1所述的一种热带假丝酵母DK2菌株与双氧水联合工序制备麻纤维的方法，其特征在于：所述步骤(3)中的摇床处理工艺参数为：温度10-60℃，转速10-300rpm，处理时间10min-5d；脱胶工艺参数为：脱胶时间10min-24h，脱胶温度50-80℃，升温速度0.1-10℃/min，氢氧化钠用量为麻类原料质量的0.5％-30％。