[发明专利]一种改良的扩增受阻突变检测体系引物及应用

权利要求书

1.一种改良的扩增受阻突变检测体系引物，其特征在于：包括上游引物和下游引物，其中，上游引物的5’末端引入2-3个不与靶序列配对的碱基，并且所述上游引物3’末端倒数第三个碱基位置引入错配碱基。

2.根据权利要求1所述的改良的扩增受阻突变检测体系引物，其特征在于：所述上游引物5’末端引入的碱基为GG、CC或CG。

3.根据权利要求1所述的改良的扩增受阻突变检测体系引物，其特征在于：所述上游引物3’末端的错配碱基为强错配碱基和中强错配碱基，所述强错配碱基包括C-T和G-A，所述中强错配碱基包括A-A、G-G和C-C 。

4.权利要求1至3任一项所述的改良的扩增受阻突变检测体系引物在扩增受阻突变检测体系中的应用。

5.一种引物，用于采用扩增受阻突变检测体系检测EGFR21外显子L858R G>T突变，其特征在于：所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的5’末端引入2-3个不与靶序列配对的碱基，并且所述上游引物3’末端倒数第三个碱基位置引入错配碱基。

6.根据权利要求5所述的引物，其特征在于：所述上游引物5’末端引入的碱基为GG、CC或CG。

7.根据权利要求5所述的引物，其特征在于：所述上游引物3’末端的错配碱基为强错配碱基和中强错配碱基，所述强错配碱基包括C-T和G-A，所述中强错配碱基包括A-A、G-G和C-C。

8.根据权利要求5所述的引物，其特征在于：所述上游引物为具有SEQ ID NO：1所示序列的上游引物，所述下游引物为具有SEQ ID NO：4所示序列的下游引物。

9.一种检测EGFR21外显子L858R G>T突变的试剂盒，其特征在于：包括具有SEQ ID NO：1的上游引物以及具有SEQ ID NO：4所示序列的下游引物。

10.根据权利要求5所述的检测EGFR21外显子L858R G>T突变的试剂盒，其特征在于：还包括具有SEQ ID NO：5的Taqman探针，所述Taqman 探针的5’末端和3’末端分别被FAM和BHQ1标记。