[发明专利]酶法联产绿豆ACE抑制肽和免疫活性肽的工艺方法在审
| 申请号: | 201510000269.4 | 申请日: | 2015-01-04 |
| 公开(公告)号: | CN104531816A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
| 发明(设计)人: | 刁静静;张建强;陈洪生;张丽萍 | 申请(专利权)人: | 黑龙江八一农垦大学 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34 |
| 代理公司: | 哈尔滨东方专利事务所 23118 | 代理人: | 曹爱华 |
| 地址: | 163319 黑龙江省*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 联产 绿豆 ace 抑制 免疫 活性 工艺 方法 | ||
1.一种酶法联产绿豆ACE抑制肽和免疫活性肽的工艺方法,其特征在于:这种酶法联产绿豆ACE抑制肽和免疫活性肽的工艺方法:
(1)将绿豆蛋白粉溶解于小分子活化水,配置成质量百分比浓度为7%-40%的蛋白溶液;将蛋白溶液置于90℃恒温水浴锅中预热10~15 min后再冷却至40℃~50℃;
(2)绿豆蛋白的酶解:将冷却后的绿豆蛋白溶液用1mol/L NaOH 调节,使pH值在8.0~9.5;加入酶用量与底物蛋白质量之比为1% - 3%的碱性蛋白酶,碱性蛋白酶的酶活力200000U,于45℃~55℃水浴下水解2-4 h,反应过程中不断加入1 mol/L的NaOH,使pH保持恒定,待水解结束后调节pH到7.0, 95℃~100℃灭活10min,移出上清液;
(3)绿豆降血压肽的制备:将步骤(2)制备的绿豆肽采用截留分子量分别为1kDa和3kDa的超滤膜进行处理,将截留后的1kDa-3kDa的滤过液经冷冻干燥即得绿豆ACE 抑制肽粉末产品;
(4)绿豆免疫活性肽的制备:将步骤(3)处理后的剩余溶液采用中性蛋白酶和风味蛋白酶继续进行水解2~3h,移出上清液;中性蛋白酶与风味蛋白酶的质量比为1:2;
(5)将步骤(4)制备得到的上清液采用1kDa的超滤膜截留分子量小于1kDa的绿豆肽,采用纳滤膜进行脱盐处理,将处理后的滤液经冷冻干燥即可得到绿豆免疫活性肽。
2.根据权利要求1所述的酶法联产绿豆ACE抑制肽和免疫活性肽的工艺方法,其特征在于:所述的中性蛋白酶的酶用量与底物蛋白质量之比为0.5%~1.5%,风味蛋白酶的酶用量与底物蛋白质量之比为1%~2% 。
3.根据权利要求2所述的酶法联产绿豆ACE抑制肽和免疫活性肽的工艺方法,其特征在于:所述的步骤(4)得到的绿豆ACE抑制肽得率为47.14%。
4.根据权利要求2所述的酶法联产绿豆ACE抑制肽和免疫活性肽的工艺方法,其特征在于:所述的步骤(5)得到的绿豆免疫肽得率为32.8%。
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