[发明专利]用于编码多个PCR反应进行测定识别的方法有效
| 申请号: | 201480067941.5 | 申请日: | 2014-12-18 |
| 公开(公告)号: | CN105793440B | 公开(公告)日: | 2020-03-17 |
| 发明(设计)人: | A.古普塔;K.詹斯森;N.纽顿;N.乔恩布伦纳 | 申请(专利权)人: | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12Q1/6806 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 梁谋;石克虎 |
| 地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 编码 pcr 反应 进行 测定 识别 方法 | ||
1.一种用于制备多种反应混合物的方法,所述多种反应混合物用于执行多种靶核酸的聚合酶链式反应(PCR)扩增,所述方法包括:
提供第一主混合物溶液,所述溶液包含至少一种执行第一靶核酸的PCR扩增所需的物质,且进一步包含第一荧光染料和第二荧光染料,其中所述第一染料和所述第二染料以所述第一试剂溶液独有的预定浓度比存在;
提供第二主混合物溶液,所述溶液包含至少一种执行第二靶核酸的PCR扩增所需的物质,且进一步包含所述第一荧光染料和所述第二荧光染料,其中所述第一染料和所述第二染料以预定浓度比存在,所述预定浓度比不同于所述第一主混合物溶液的浓度比且是所述第二主混合物溶液所独有的;
将所述第一主混合物溶液加入第一反应混合物以执行所述第一靶核酸的PCR扩增;和
将所述第二主混合物溶液加入第二反应混合物以执行所述第二靶核酸的PCR扩增,其中在所述第一主混合物溶液或所述第二主混合物溶液中,所述预定浓度比是在0.2和5之间,
其中所述第一荧光染料是JA270,且所述第二荧光染料是Cy5.5。
2.一种用于编码执行靶核酸的聚合酶链式反应(PCR)扩增所用的主混合物溶液的身份的方法,所述方法包括:
在主混合物溶液中将以预定浓度比存在的第一荧光染料和第二荧光染料混合在一起,所述预定浓度比产生所述第一荧光染料相对于所述第二荧光染料的荧光比,所述荧光比可与从其它主混合物溶液产生的荧光比区分开;
检测来自所述第一荧光染料和来自所述第二荧光染料的荧光;和
确定所述荧光比,由此鉴定所述主混合物溶液,其中所述预定浓度比是在0.2和5之间,
其中所述第一荧光染料是JA270,且所述第二荧光染料是Cy5.5。
3.一种用于执行多种靶核酸的聚合酶链式反应(PCR)扩增的试剂盒,所述试剂盒包含多种主混合物溶液,其中来自所述多种主混合物溶液的每一种主混合物溶液包含至少一种执行特定靶核酸的PCR扩增所需的物质,且进一步包含第一荧光染料和第二荧光染料;且其中对于所述每一种主混合物溶液,所述第一荧光染料和所述第二荧光染料以不同的浓度比存在并产生与来自所述多种主混合物溶液的每种其它主混合物溶液可辨别的荧光比,其中所述浓度比选自0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.25、1.66、2.5和5.0,且其中所述第一荧光染料是JA270,且所述第二荧光染料是Cy5.5。
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