[发明专利]用于向受试者的气道施用酶的组合物和方法

说明书

本申请要求2013年11月4日提交的美国临时专利申请号61/899739的权益，该临时专利申请的全部内容以引用的方式并入本文中。

发明背景

1.发明领域

本发明大体涉及分子生物学、药物递送以及医学领域。更具体来说，它涉及用于向受试者的呼吸系统递送治疗性酶组合物的组合物和方法。

2.相关技术说明

具有严重烧伤和烟雾暴露的许多患者产生被称为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的严重形式的ALI(急性肺损伤)，其与30-40％的死亡率、延长的住院治疗以及长期发病率有关。吸入烟雾(IS)诱导型ALI(ISALI)的特征在于严重的气道阻塞、纤维蛋白气道脱落物或碎片以及肺泡纤维蛋白沉积。现在缺乏对ISALI的有效特异性治疗。

烧伤在美国每年影响超过1百万个患者，而在民用和军事实践中ISALI每年影响数千烟雾暴露患者(Enkhbaatar等,2004a)。ISALI在美国每年促成超过3000例死亡和17,000例火灾相关损害以及每100,000人口2-3例的火灾相关死亡率，这在发达国家中是比率最高者之一[Committeeoninjuryandpoisonprevention(2000)Pediatrics105:1355-1357]。支持性护理是不理想的、长期的并且昂贵的。结果引起显著死亡率和发病率。尽管目前存在包括机械通气的支持性护理，包括与ISALI相关的ARDS的死亡率仍接近30-40％(Phua等,2009)。

这些考虑要求测试新的和可能更有效的治疗。ISALI与严重的呼吸障碍、延长的住院治疗以及常常需要机械通气相关联。ISALI的长期并发症包括支气管反应性、肺纤维化加速以及支气管扩张。在所有形式的ALI中，ISALI特别容易发生异常纤维蛋白周转，包括在大的气道中形成的纤维蛋白脱落物和肺泡中的纤维蛋白(Enkhbaatar等,2004a)。支气管脱落物干扰气体交换，往往需要支气管镜清除术并且促进肺不张。当在临床实践中使用雾化肝素和N-乙酰半胱氨酸时，仍未在任何随机或前瞻性控制的临床试验中证实雾化肝素在ISALI患者中的功效(Tuinman等2012)，单独肝素当在我们在绵羊中进行的研究中加以测试时也未证明改善ISALI(Enkhbaatar等,2008a；Enkhbaatar等,2008b)。肝素不清除已确定的凝块并且雾化肝素可能在ISALI中引发系统性凝血病(O'Donnell,2012)。

发明概述

本文提供制备用于向受试者的气道施用的酶溶液的方法，该方法包括将酶溶液雾化(例如使用振动筛网雾化器)。酶可以是组织型纤溶酶原活化剂，其包括单链尿激酶型纤溶酶原活化剂(scuPA)和组织型纤溶酶原活化剂(tPA)。在一些实施方案中，振动筛网雾化器是ProfessionalNebulizer或EZBreatheAtomizer。

因此，在第一个实施方案中，提供一种制备用于向受试者的气道施用的酶溶液的方法，其包括将酶溶液雾化以提供雾化溶液。在某些方面，酶可以是纤溶酶原活化剂，诸如单链尿激酶型纤溶酶原活化剂(scuPA)或组织型纤溶酶原活化剂(tPA)。在某些方面，可以通过使用振动筛网雾化器将酶溶液雾化。在一些方面，将酶溶液雾化不包括使用喷射雾化器或超声波雾化器。在某些方面，将实施方案的酶溶液雾化可以包括提供足够的雾化能量和/或时间，以提供具有约2.5μm与10μm、2.5μm与8μm或3.0μm与6μm之间的的中值液滴尺寸的雾化溶液。在一些具体方面，将酶溶液雾化包括获得冻干酶组合物，使冻干酶组合物在溶液(例如水溶液)中复水以提供酶溶液，并且将酶溶液雾化。因此，在另一实施方案中，提供一种根据实施方案的方法制备的雾化酶溶液。

在另一实施方案中，提供一种包含scuPA或tPA的雾化溶液的组合物。在一些方面，实施方案的组合物或酶溶液可以是水溶液。在某些方面，酶溶液包含生理上可接受的盐浓度和/或pH缓冲剂。举例来说，酶溶液可以是无菌盐水溶液或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。在优选方面，组合物或酶溶液包含scuPA。