[发明专利]微流控装置及其在多细胞分泌检测中的使用方法

权利要求书

1.一种鉴定一含有一具有胞外效应的效应细胞的细胞群的方法，包括：

在微型反应器内保留一含有一种或多种效应细胞的细胞群，其中所述微型反应器的内 含物还包含一含有一种或多种读出颗粒的读出颗粒群，

在所述微型反应器内孵育所述细胞群和所述一种或多种读出颗粒，

检测所述细胞群是否存在所述胞外效应，其中所述读出颗粒群或其一亚群提供所述胞 外效应的一直接或间接的读出结果，且

基于所述检测步骤的结果测定所述细胞群内的一种或多种效应细胞是否显示出所述 胞外效应。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述微型反应器是一微流体小室。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述微流体小室是一包括膜阀的微流体结构的部分。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述一种或多种效应细胞含有一抗体分 泌细胞(ASC)。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述一种或多种效应细胞含有一浆细胞、 B细胞、浆母细胞、通过记忆B细胞扩增产生的一细胞、一杂交瘤细胞、一T细胞、CD8+T细胞， 与CD4+T细胞、一经过工程化的产生抗体的重组细胞、一经过工程化的表达一T细胞受体的 重组细胞，或其组合。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述细胞群含有从约2个到约500个细胞 或从约10个到约50个细胞。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述细胞群含有从约2个到约10个细胞。

8.如权利要求6所述的方法，其中所述细胞群含有从约50个细胞到约100个细胞。

9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述读出颗粒群含有一种或多种读出小 珠、读出细胞、或其一组合。

10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述读出颗粒群含有一蛋白或多肽。

11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述读出颗粒群含有一病毒颗粒、细胞 因子、趋化因子、神经递质、生长因子、激素、膜提取物、脂颗粒、稳定的受体、一受体的一胞 外结构域、一用一膜提取物功能化的囊泡、一用一膜提取物功能化的小珠、一经过功能化的 作为一稳定的可溶性蛋白的G蛋白偶联受体(GPCR)、或其组合。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述读出颗粒群的所述读出颗粒具有 小于约500纳米的，或从500纳米到50纳米的平均直径。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述读出颗粒群的所述读出颗粒具有从约1微米到 约10微米的平均直径。

14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述读出颗粒群含有一种或多种在其 表面表达一ATP结合框转运蛋白(ABC转运蛋白)的读出细胞，且所述胞外效应是所述ABC转 运蛋白的拮抗、所述ABC转运蛋白的激活，或所述ABC转运蛋白被所述一种或多种效应细胞 中的一种结合，或所述一种或多种效应细胞中的一细胞细胞分泌的一分子。

15.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述读出颗粒群含有一种或多种在其 表面表达一G蛋白偶联受体(GPCR)或一可溶的GPCR的读出细胞，并且所述胞外效应是所述 GPCR的拮抗、所述GPCR的激活或所述GPCR被所述一种或多种效应细胞中的一效应细胞结 合，或被所述一种或多种效应细胞中的一效应细胞分泌的一分子。

16.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述读出颗粒群含有一种或多种在其 表面表达一酪氨酸激酶受体(RTK)的读出细胞，并且所述胞外效应是所述RTK的拮抗、所述 RTK的激活或所述GPCR被所述一种或多种效应细胞中的一效应细胞结合，或被所述一种或 多种效应细胞中的一效应细胞分泌的一分子。