[发明专利]通过代谢工程化的酵母菌株调节由玉米生产乙醇期间的氮代谢的方法

权利要求书

1.一种重组微生物，其包括：

a.至少一种导致在一种或多种乙醇生产途径中发挥作用的一种或多种天然酶和/或异源酶上调或下调的工程化基因修饰；

b.至少一种导致甘油生产途径中的酶下调的工程化基因修饰；以及

c.至少一种导致氮同化途径中的酶上调或下调的工程化基因修饰。

2.权利要求1所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中的下调的酶是谷氨酸脱氢酶(Gdh)(EC1.4.1.4)。

3.权利要求1所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中下调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列具有与选自SEQIDNO：25和31(酿酒酵母Gdh1和Gdh3)的多肽序列至少约80％的同一性。

4.权利要求3所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中下调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列具有与选自SEQIDNO：25和31(酿酒酵母Gdh1和Gdh3)的多肽序列至少约90％的同一性。

5.权利要求3-4任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中下调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列具有与选自SEQIDNO：25和31(酿酒酵母Gdh1和Gdh3)的多肽序列至少约95％的同一性。

6.权利要求3-5任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中下调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列与选自SEQIDNO：25和31(酿酒酵母Gdh1和Gdh3)的多肽序列相同。

7.权利要求2-6任一项所述的重组微生物，其中所述微生物进一步包括至少一种导致在氮同化途径中的酶上调的基因修饰。

8.权利要求1-7任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶是异源酶。

9.权利要求1-7任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶是天然酶。

10.权利要求1-9任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶是至少一种选自谷氨酸脱氢酶(Gdh)(EC1.4.1.2)、谷氨酸合酶(Glt)(EC1.4.1.14)和谷氨酰胺合酶(Gln)(EC6.3.1.2)的酶。

11.权利要求10所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶是分离自选自酿酒酵母属和脉胞菌属的生物体的Gdh2(Gdh2)。

12.权利要求1-10任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列具有与选自SEQIDNO：27和29(Gdh2)的多肽序列至少约80％的同一性。

13.权利要求12所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列具有与选自SEQIDNO：27和29(Gdh2)的多肽序列至少约90％的同一性。

14.权利要求12-13任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列具有与选自SEQIDNO：27和29(Gdh2)的多肽序列至少约95％的同一性。

15.权利要求12-14任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列与选自SEQIDNO：27和29(Gdh2)的多肽序列相同。

16.权利要求1-10任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶是分离自酿酒酵母属生物体的Glt1(Glt1)。

17.权利要求16所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列具有与SEQIDNO：33(Glt1)编码的多肽序列至少约80％的同一性。

18.权利要求16-17任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列具有与SEQIDNO33(Glt1)编码的多肽序列至少约90％的同一性。

19.权利要求16-18任一项所述的重组微生物，其中所述在氮同化途径中上调的酶由多肽序列编码，所述多肽序列具有与SEQIDNO：33(Glt1)编码的多肽序列至少约95％的同一性。