[发明专利]焦磷酸测序法检测EML4-ALK融合基因的引物对及试剂盒

权利要求书

1.一种焦磷酸测序法检测EML4-ALK融合基因的引物对，所述的EML4-ALK为EML4-ALK variant 1和EML4-ALK variant 3中的任意一种或两种，其特征在于，所述引物对包括：

(1)对于EML4-ALK variant 1基因，

扩增引物为：

上游引物：5′-CACACCTGGGAAAGGACCTAAA-3′，

下游引物：5′-CGGAGCTTGCTCAGCTTGTACT-3′，

其中下游引物的5′端进行生物素标记；

测序引物为：

5′-TGGGAAAGGACCTAAA-3′；

(2)对于EML4-ALK variant 3基因：

扩增引物为：

上游引物：5′-TGCAGACAAGCATAAAGATGTCAT-3′，

下游引物：5′-TTGGGGTTGTAGTCGGTCAT-3′，

其中上游引物的5′端进行生物素标记；

测序引物：

5′-GTGCTTCCGGCGGTA-3′。

2.一种焦磷酸测序法检测EML4-ALK融合基因的试剂盒，所述的EML4-ALK为EML4-ALK variant 1和EML4-ALK variant 3中的任意一种或两种，其特征在于，所述试剂盒包含如下所述的引物对：

(1)对于EML4-ALK variant 1基因，

扩增引物为：

上游引物：5′-CACACCTGGGAAAGGACCTAAA-3′，

下游引物：5′-CGGAGCTTGCTCAGCTTGTACT-3′，

其中下游引物的5′端进行生物素标记；

测序引物为：

5′-TGGGAAAGGACCTAAA-3′；

(2)对于EML4-ALK variant 3基因：

扩增引物为：

上游引物：5′-TGCAGACAAGCATAAAGATGTCAT-3′，

下游引物：5′-TTGGGGTTGTAGTCGGTCAT-3′，

其中上游引物的5′端进行生物素标记；

测序引物：

5′-GTGCTTCCGGCGGTA-3′。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括质控品，所述质控品包括阳性对照品和阴性对照品。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的阳性对照品为含有EML4-ALK variant 1和EML4-ALK variant 3的质粒的混合液，所述的阴性对照品为不含EML4-ALK variant 1和EML4-ALK variant 3的质粒溶液。

5.权利要求1所述的引物对在制备检测EML4-ALK融合基因的试剂中的应用。

6.权利要求2所述的试剂盒在制备检测EML4-ALK融合基因的试剂中的应用。