[发明专利]L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法有效
申请号: | 201410794723.3 | 申请日: | 2014-12-19 |
公开(公告)号: | CN104483406A | 公开(公告)日: | 2015-04-01 |
发明(设计)人: | 李斌水;何瑞红;郭志建;张柳 | 申请(专利权)人: | 精晶药业股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人: | 陆林生 |
地址: | 055550*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 精氨酸 酮戊二酸 高效 色谱 检测 方法 | ||
1.一种L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于,其色谱条件为:
色谱柱:C18色谱柱;
流动相:0.02mol/L~0.08mol/L磷酸盐缓冲液,pH3.0-4.0;
流动相流速:0.5-1.3ml/min;
检测波长:200-210nm;
色谱柱柱温:15℃~30℃;
进行高效液相色谱分析,测定L-精氨酸-α-酮戊二酸或其制剂中L-精氨酸和α-酮戊二酸的含量。
2.根据权利要求1所述的L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)配制流动相,调节pH值,过滤、脱气;
(2)调节高效液相色谱仪条件,开机平衡色谱柱;
(3)对照品和供试品溶液的配置:称取L-精氨酸和α-酮戊二酸对照品及L-精氨酸-α-酮戊二酸供试品,分别用流动相溶解定容,即得;
(4)将对照品溶液、供试品溶液过滤后注入高效液相色谱仪,记录色谱图及峰面积,采用外标法计算含量。
3.根据权利要求1或2所述的L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于所述L-精氨酸-α-酮戊二酸中L-精氨酸与α-酮戊二酸的摩尔比为1∶1或2∶1。
4.根据权利要求1所述的L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于所述流动相为0.05mol/L磷酸盐缓冲液。
5.根据权利要求1或4所述的L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于所述磷酸盐缓冲液为磷酸二氢钠或磷酸二氢钾缓冲液。
6.根据权利要求5所述的L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于所述磷酸盐缓冲液的pH值为3.4。
7.根据权利要求1所述的L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于所述流动相流速为1.0ml/min;检测波长为205nm。
8.根据权利要求2所述的L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于,L-精氨酸与α-酮戊二酸的摩尔比为1∶1的L-精氨酸-α-酮戊二酸供试品溶液的浓度为0.3-1.0mg/mL;L-精氨酸与α-酮戊二酸的摩尔比为2∶1的L-精氨酸-α-酮戊二酸供试品溶液的浓度为0.5-1.5mg/mL。
9.根据权利要求8所述的L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于,L-精氨酸与α-酮戊二酸的摩尔比为1∶1的L-精氨酸-α-酮戊二酸供试品溶液的浓度为0.64mg/mL;L-精氨酸与α-酮戊二酸的摩尔比为2∶1的L-精氨酸-α-酮戊二酸供试品溶液的浓度为0.96mg/mL。
10.根据权利要求8所述的L-精氨酸-α-酮戊二酸的高效液相色谱检测方法,其特征在于,进样体积为20μl。
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