[发明专利]一种提高α-淀粉酶表达量的通用型枯草芽胞杆菌整合表达载体

权利要求书

1.一种提高α-淀粉酶表达量的枯草芽胞杆菌整合表达载体，其特征在于其载体序列为序列5。

2.一种如权利要求1所述的枯草芽胞杆菌整合表达载体，其特征在于：包含枯草芽胞杆菌的grac启动子序列，用于整合各种枯草芽胞杆菌中可能涉及表达调控相关元件的多克隆位点序列，用于整合amyE位点的基因5’和3’同源臂序列，还包含有大肠杆菌复制子以及氯霉素抗性基因编码序列。

3.根据权利要求2所述的枯草芽胞杆菌整合表达载体，其特征在于枯草芽胞杆菌的grac启动子序列，用于插入各种表达调控元件片段的多克隆位点序列，用于整合amyE位点的基因5’和3’同源臂序列，其核苷酸序列分别为序列1，序列2，序列3和序列4。

4.根据权利要求1所述的枯草芽胞杆菌整合表达载体，其特征在于其整合的宿主细胞为枯草芽胞杆菌。

5.根据权利要求4所述的一种表达α-淀粉酶的基因工程菌株，具体为基因组amyE位点整合有带有grac启动子的胞壁分子伴侣PrsA基因（GenebankAccessionNumberX57271.1）的枯草芽孢杆菌宿主细胞，对α-淀粉酶的表达分泌有明显的促进作用。

6.根据权利要求4所述的整合有其他涉及外源蛋白表达分泌瓶颈的限制性因子（SecA、SecDF、SecG、Ffh、SipU、SipV、SipW）的枯草芽胞杆菌基因工程菌株，对α-淀粉酶的表达分泌有不同程度的促进作用。