[发明专利]一种对乳或乳制品中酵母β-葡聚糖进行前处理的方法

说明书

本文涉及一种对乳或乳制品中酵母β‑葡聚糖进行前处理的方法，所述方法包括如下步骤：(1)蛋白酶解：用中性蛋白酶和碱性蛋白酶对乳或乳制品进行酶解；(2)滤器过滤分离：采用滤器对步骤(1)获得的酶解液进行过滤；(3)酸解：向步骤(2)获得的截留物中加入一元酸进行加热水解。

技术领域

本发明涉及一种前处理方法，特别是一种对乳或乳制品中酵母β-葡聚糖进行前处理的方法。

背景技术

酵母β-葡聚糖(yeast beta glucan)是一种从酵母细胞壁中提取的葡萄糖聚合物，其分子结构主链包含β-1,3-D糖苷键，而支链包含β-1,6-D糖苷键，两者之比约为85:15。酵母β-葡聚糖的线性分子聚合度为1500、分子量约为240kDa，支链分子聚合度为140、分子量约为22kDa。酵母β-葡聚糖作为重要的食品膳食纤维来源，具有增强免疫力、防氧化辐射、抗肿瘤炎症、降低血脂胆固醇、促进伤口愈合等诸多营养价值和生理功能。2010年6月卫生部9号公告批准酵母β-葡聚糖作为新资源食品，2012年卫生部6号公告批准酵母β-葡聚糖用作食品添加剂(营养强化剂)。作为原料，酵母β-葡聚糖在食品和保健品中的应用更为广泛。饮用添加酵母β-葡聚糖的牛乳中可实现增强免疫力的功效。

由于酵母β-葡聚糖是一种水不溶性多糖，并与甘露聚糖、蛋白或几丁质等物质相互结合，其测定方法一直是个研究难点。传统的苯酚-硫酸法由于灵敏度较低，且易受其它多糖或单糖的干扰，测定结果不准确。为了改善测定结果的准确性，增加了对酵母β-葡聚糖进行前处理的步骤，利用所述前处理步骤将β-葡聚糖转化为易于测定的葡萄糖，再通过高效液相色谱法或离子色谱法等对前处理步骤获得的葡萄糖进行测定。所述前处理可以是例如利用强酸将葡聚糖水解为葡萄糖([非专利文献1])，或在碱性条件下将酵母细胞壁中的β-葡聚糖和甘露寡糖解离成阴离子([非专利文献2])。前处理步骤使得不需要预先衍生就能分析几乎所有的单糖和大部分的寡糖及低聚糖。

特别地，对于在乳或乳制品中添加酵母β-葡聚糖而言，由于在加工过程中为了防止脂肪球上浮，会采用高速剪切均质破碎乳品中的脂肪颗粒，不溶于水的葡聚糖颗粒也遭到破坏。此外，乳品基质极其复杂，其中的脂肪球、蛋白束、稳定剂和香精配料都将影响对酵母β-葡聚糖的提取与纯化，因此如何准确测定乳和乳制品中的酵母β-葡聚糖仍是具有挑战性的课题。目前，只有AOAC 32.2.10标准《AOAC Official Method995.16β-D-Glucan inBarley and Oats》和农业行业标准NY/T 2006-2011《谷物及其制品中β-葡聚糖含量的测定》对水溶性β-葡聚糖的检测进行了标准化，但对于水不溶性β-葡聚糖，特别是乳和乳制品中的酵母β-葡聚糖，国内外均缺少的成熟的检测标准和相关技术。

因此，如何对含有酵母β-葡聚糖的乳或乳制品进行前处理，从而获得准确可复现的检测结果，仍是亟待解决的问题。

[非专利文献1]：牛乳中酵母β-葡聚糖的应用与测定，付俊鹤等，《食品工业科技》2013年第4期；

[非专利文献2]：离子色谱—脉冲安培检测法测定酵母细胞壁中β-葡聚糖和甘露寡糖，李仁勇等，《食品与发酵工业》20008年第12期。

发明内容

发明人通过实验发现，添加有酵母β-葡聚糖的乳或乳制品在经过高速剪切均质破碎脂肪后，酵母β-葡聚糖颗粒的直径由最初的数十微米缩小至1.0μm以下，大部分集中在0.5至0.7μm(图1)。

因此，针对如上所述的技术问题，本发明提供了一种对乳或乳制品中酵母β-葡聚糖进行前处理的方法。具体而言，本发明的前处理方法包括如下步骤：

(1)蛋白酶解：用中性蛋白酶和碱性蛋白酶对乳或乳制品进行酶解；

(2)滤器过滤分离：采用滤器对步骤(1)获得的酶解液进行过滤；

(3)酸解：向步骤(2)获得的截留物中加入一元酸进行加热水解。