[发明专利]黄皮中一种新的咔唑生物碱、其制备方法与用途

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物领域，具体涉及黄皮中一种新的咔唑生物碱，及该化合物的制备方法与医药用途。

背景技术

芸香科（Rutaceae）黄皮属（Clausena）植物具有广泛的药理活性，国内外学者对此进行了深入的研究。本属植物全世界约有30种，分布于热带、亚热带地区；我国有近10种，分布于长江以南各省，以云南南部、广东、广西、海南及台湾等省分布较为集中，资源丰富。该属植物在我国自古即为药用，古代及现代的中草药书籍中多有收载，民间应用更为广泛。药理研究表明，它们具有保肝、降脂、解痉、抑菌及抗癌等生物活性。有关其化学成分的研究报道很多，主要化学成分为挥发油、香豆素类和生物碱类化合物。其中，与本发明有关的咔唑生物碱就是其中一类生物碱类化合物。该属中代表性咔唑生物碱化合物结构式如下：

黄皮Clausena lansium (Lour.) Skeels是芸香科黄皮属植物，别名黄弹、黄皮子、黄弹子、黄檀子等。黄皮是原产于我国热带以及亚热带地区的一种特产果树，在我国至少已有1500年的栽培历史。国内主要分布于广东、广西、福建、台湾、云南、海南等地。黄皮具有很高的药用价值，黄皮的果、叶、根、种子均能入药。黄皮的果实有行气、消食、化痰之功效，主治食积胀满，脘腹疼痛， 疝痛，痰饮，咳喘。根、叶及种子也可治腹痛、胃痛、感冒发热等症。20世纪80年代，从黄皮叶中分离得到黄皮酰胺类化合物，发现该类化合物具有较强的药理活性。此后，对黄皮活性成分的分离以及药理作用的研究在医药界得到广泛的关注。 

随着肿瘤发病机制的不断阐明和抗肿瘤作用靶点的不断发现，多靶点抑制肿瘤信号转导成为肿瘤药物开发的重要方向。相对于单靶点药物和多种单靶点药物联用来说，多靶点药物具有更多优越性：可避免产生药物相互作用，减少不良反应，治疗作用全面等。在各种分子靶点中，蛋白酷氨酸激酶( protein tyrosine kinase，PTK) 是目前效果明显且前景广阔的抗肿瘤药物靶点之一。PTK是一组催化蛋白质酪氨酸残基磷酸化的酶系，其在细胞内的信号转导中起着十分重要的作用，也与肿瘤细胞的生长、增殖、分化和凋亡密切相关，通过抑制PTK 可破坏肿瘤细胞的信号传递，抑制肿瘤细胞增殖，从而达到抗肿瘤的目的。目前已经有多种结构的酪氨酸激酶抑制剂类抗肿瘤药物上市或进入临床研究，并取得了良好的治疗效果，如伊马替尼等替尼类药物。

发明人在对黄皮化学成分研究中，采用硅胶柱色谱法从正丁醇萃取物中分离鉴定了一个新的咔唑生物碱类化合物，该化合物为首次报道。多种体外活性筛选表明：该化合物具有显著的抗菌作用和与阳性药相当的抑制蛋白酪氨酸激酶的作用，可以进一步开发用来制备抗菌药物和以蛋白酪氨酸激酶为靶标的药物。

发明内容

本发明的目的是提供一种从黄皮中分离得到的一种新的咔唑生物碱类化合物Ⅰ。

本发明的另一目的是提供一种从黄皮中分离纯化化合物Ⅰ的制备方法。

本发明的再一目的在于提供化合物Ⅰ在制备抗菌药物和以蛋白酪氨酸激酶为靶标的药物的应用。

根据本发明的一方面，提供具有下列化学结构式Ⅰ的化合物：

根据本发明的另一目的是提供一种从黄皮中分离纯化化合物Ⅰ的制备方法，其制备步骤包括：

A. 将黄皮叶或根用醇或醇溶液提取一次或多次，过滤，收集滤液，再减压浓缩干燥，获得醇提取物；

B. 将醇提取物加水制成混悬液，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，正丁醇萃取液减压浓缩，得正丁醇部位浸膏；

C. 将正丁醇部位浸膏进行柱色谱分离纯化，得到纯的化合物Ⅰ。

步骤C详细包括：①将正丁醇浸膏用硅胶柱层析分段，二氯甲烷-甲醇梯度洗脱（20:1, 10:1, 5:1, 1:1），收集二氯甲烷-甲醇（体积比10:1）洗脱物；②取二氯甲烷-甲醇（体积比10:1）洗脱物进行MCI柱层析去除色素，用水-甲醇梯度洗脱（体积比70:30, 50:50, 30:70），收集水-甲醇（体积比30:70）洗脱物；③取水-甲醇（体积比30:70）洗脱物进行硅胶柱层析，用二氯甲烷-甲醇梯度洗脱（体积比15:1, 12:1, 10:1），收集二氯甲烷-甲醇（体积比12:1）洗脱物浓缩；④取二氯甲烷-甲醇（体积比12:1）洗脱物用制备型高效液相色谱分离，水-甲醇梯度洗脱，从水-甲醇（体积比35:65）洗脱部位得到纯的化合物Ⅰ。