[发明专利]黄花蒿蜡油脂肪酸及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种脂肪酸的制备方法，具体指从黄花蒿蜡油中制备脂肪酸的方法。 

背景技术

黄花蒿（Artemisia annua L.）是菊科艾属的一年生草本植物，为我国传统中药，其有效成分—青蒿素用于疟疾防治的价值已被人类认识和接受。黄花蒿蜡油（wax oil）为黄花蒿有机溶剂（8#溶剂油）提取青蒿素初纯化残余物，色泽暗黑，气味浓郁，半固体状，富含大量挥发油、叶绿素、脂肪酸、植物蜡等化学成分，具有重要的开发价值。目前生产1吨青蒿素可产生蜡油副产物约5吨，具初略估计，全国约20家较具规模青蒿素生产企业产生腊油约500吨/年。但青蒿素行业对于蜡油尚未开展系统研究，更没有进行综合开发与利用，大量蜡油作为废弃物处理，不仅造成资源严重浪费，更带来一系列环境问题。

脂肪酸具有重要的食用、药用以及工业用等多种用途，受到广泛的研究与开发。研究表明，黄花蒿含有多种人体必需脂肪酸成分，有较强的生理活性和较高的保健价值，还富含重要工业用途的脂肪酸成分。因此，以黄花蒿蜡油为原料，从中提取具有生理活性和保健价值的脂肪酸，对于提升黄花蒿蜡油的附加值、拓宽黄花蒿的产业口径和保护环境都具有重要意义。

发明内容

为解决上述黄花蒿蜡油开发利用难、环境污染重存在的技术问题，本发明人经过长期的试验，终于发明出一种以黄花蒿蜡油为主要原料，制备脂肪酸的方法，得到的黄花蒿蜡油脂肪酸产品具有较强的生理活性和保健价值以及重要的工业用途。

本发明包括以下几个步骤：

（1）采用水蒸气蒸馏法将黄花蒿蜡油中的挥发性成分除去；

（2）将除挥发性成分的黄花蒿蜡油加入2-3倍60-90 ℃沸程石油醚溶解蜡油后过滤，重复2-3次，合并并浓缩滤液得油脂浸膏；

（3）浸膏加入质量分数为1-3%的过量NaOH-甲醇溶液，回流1-3h使之完全皂化，静置、过滤得脂肪酸皂化物；

（4）往脂肪酸皂化物中加入0.2-0.8mol/L 盐酸使pH 值为3-4、静置，加入乙醚萃取1-3次，合并乙醚层，浓缩回收乙醚，即得黄花蒿蜡油脂肪酸。

将得到的黄花蒿蜡油脂肪酸进行酸值、皂化值、碘值分析，结果显示：酸值为130-150 mgKOH/g，对应的游离脂肪酸质量分数为60-70%，可见蜡油脂肪酸组分比较纯，游离脂肪酸含量较高；皂化值为150-170 mgKOH/g，相比常用油脂的皂化值小很多，说明组成蜡油脂肪酸组分分子量比较高，大于常见油脂；蜡油脂肪酸的碘值为45-55mg/100g，可见蜡油脂肪酸属于干性油脂，不饱和程度较低，不容易被氧化而酸败变质。

将得到的黄花蒿蜡油脂肪酸甲酯化后进行GC/MS分析，检出14个脂肪酸组分，其中饱和脂肪酸含量最高，包括肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、二十二烷酸等组分，相对含量为32-36 %。单不饱和脂肪酸主要为油酸，含量较高，相对含量为7-9 %。多不饱和脂肪酸含量较低，包括亚油酸、二十二碳四烯酸等，相对含量为5-6 %。微量的十五烷酸甲醚、十七烷酸甲酯以及二十三烷酸甲酯等奇数碳原子脂肪酸可能为植物蜡高温处理降解产物。

黄花蒿蜡油脂肪酸富含大量的饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸以及多不饱和脂肪酸等多种组分，为了解其生理活性和保健作用，探究了蜡油脂肪酸对人正常肝细胞L-02生物学效应。实验结果发现，蜡油脂肪酸与细胞共孵育后，可见L-02细胞形貌正常，周缘光滑，细胞核形态完整清晰，细胞与细胞间联系紧密。进一步采用MTT法检测蜡油脂肪酸对L-02生长的影响，结果表明，蜡油脂肪酸对L-02生长有一定的促进作用。孵育24 h后，浓度为0.09 mg/mL、0.033 mg/mL、0.09 mg/mL蜡油脂肪酸均促进L-02生长，生长率分别为4 %、22 %、38 %，促进效益表现为一定的浓度依赖性。而抗癌药物紫杉醇对L-02生长有抑制作用，孵育24 h后细胞抑制率为37 %。可见，蜡油脂肪酸对细胞有一定的生长促进作用。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

本发明以青蒿素生产过程中的副产物黄花蒿蜡油为原料，开拓性的发明了黄花蒿蜡油脂肪酸的制备方法，对于提升黄花蒿蜡油的附加值、拓宽黄花蒿的产业口径和保护环境都具有重要意义。

本方法的脂肪酸收率为28-32 %（w/w），可见蜡油含有丰富的脂肪酸，制备方法包括仅有四步，操作较为简单，易于自动化控制，这为蜡油脂肪酸工业化开发奠定了基础。