[发明专利]CD82/ TIMP1在制备抑制人胰腺癌细胞迁移的药物中的应用

权利要求书

1.CD82/ TIMP1在制备抑制人胰腺癌细胞迁移的药物中的应用，其特征在于，由四次跨膜蛋白超家族成员的细胞膜表面CD82分子与基质金属蛋白酶组织抑制因子的细胞外TIMP1分子直接结合，引发TIMP1分子的胞内运输、循环，阻断细胞骨架重塑，减少层形足板/丝足突出形成，抑制细胞活力、迁移。

2.根据权利要求1所述的一种CD82/ TIMP1在制备抑制人胰腺癌细胞迁移的药物中的应用包括以下制备步骤：

（1）、PANC-1细胞培养于含有10%胎牛血清、100U/ml青霉素和100U/ml链霉素的DMEM培养液中；

（2）、在低分化高迁移力PANC-1细胞的含5%血清的培养液中加入重组TIMP1，浓度依次为50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml，进行体外伤痕愈合实验，环巴胺（10uM）作为系统阳性参照物；

（3）、加入CD82干扰组，并在6小时、18小时这两个时间点分别观察细胞迁移情况；

（4）、在PANC-1细胞的含5%血清的培养液中加入重组TIMP2，浓度依次为50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml，500ng/ml，环巴胺（10uM）重复伤痕愈合实验；

（5）、收集TIMP1、环巴胺刺激后细胞样品进行流式细胞术检测；

（6）、使用荧光标记的鬼笔环肽对F-肌动蛋白进行标记，以观察PANC-1细胞中肌丝分布情况；

（7）、对其中相关信号通路进行了探索。