[发明专利]一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法

权利要求书

1.一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)将章鱼下脚料去除杂质、洗净后，进行组织捣碎匀浆，得固液比为1:2.5～25的匀浆液；

(2)在匀浆液中添加碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶或动物蛋白酶进行酶解后，通过抽滤、纱布过滤或离心进行固液分离，得第一清液，上述酶解的温度为30～70℃，酶解pH值为4.5～10，酶解时间为0.25～6h；

(3)用截留分子量1～10kDa的超滤膜对第一清液进行分离处理，得第二清液和含有混合多肽活性物质的超滤浓液，上述超滤膜的操作压力为0.1～0.4MPa，液料流速为2.5～12.5L/h；

(4)用截留分子量300～500Da纳滤膜对第二清液进行分离处理得第三清液和纳滤浓液，第三清液为复合氨基酸水解液，再对超滤浓液和纳滤浓液进行凝胶柱层析纯化后，合并得含有抗氧化活性物质的总浓液，上述纳滤膜的操作压力为0.5～0.7MPa，凝胶柱层析纯化所用的填料为DEAE-75、G75、G50或G25；

(5)分别将总浓液和第三清液经层析纯化后进行-50℃冷冻干燥，即分别得到所述抗氧化活性物质和所述复合氨基酸。

2.如权利要求1所述的一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：酶解所用酶为碱性蛋白酶，酶解温度为30～70℃，酶解pH为5～9，匀浆液固液比为1:5～25，酶添加量为0.05～0.4％；酶解时间为1～3h。

3.如权利要求1所述的一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：酶解所用酶为中性蛋白酶，酶解温度为45～65℃，酶解pH为6～10，匀浆液固液比为1:10～20，酶添加量为0.1～0.4％；酶解时间为1.2～3.5h。

4.如权利要求1所述的一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：酶解所用酶为木瓜蛋白酶，酶解温度为40～65℃，酶解pH为4.5～8.5，匀浆液固液比为1:2.5～25，酶添加量为0.005～0.08％；酶解时间为0.25～2h。

5.如权利要求1所述的一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：酶解所用酶为动物蛋白酶，酶解温度为40～65℃，酶解pH为5～9，匀浆液固液比为1:5～25，酶添加量为0.05～0.25％；酶解时间为2～6h。

6.如权利要求1所述的一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：所述步骤(2)离心的速度为4500r/min，时间为15min。

7.如权利要求1所述的一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：所述步骤(2)的纱布过滤为8层纱布过滤。

8.如权利要求1所述的一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：所述纳滤膜为截留分子量300Da的芳香酰胺卷式纳滤膜，操作压力为0.6MPa。

9.如权利要求1所述的一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：所述超滤膜为聚醚砜卷式超滤膜，其操作压力为0.25MPa。

10.如权利要求1所述的一种利用章鱼下脚料获得抗氧化活性物质和复合氨基酸的方法，其特征在于：所述步骤(5)的层析纯化所用的层析柱为DEAE-75、G75、G50或G25，洗脱液为去离子水，检测波长220nm。