[发明专利]一种抗菌肽制剂及其制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种抗菌肽制剂及其制备方法及其应用。

背景技术

    抗菌肽(antimicrobial peptides，AMPs)是动物先天性免疫的重要组成部分，是动植物防御微生物入侵的第一道屏障，具有广谱的抗菌作用，它们对革兰氏阳性菌、阴性菌和真菌都有杀灭作用，而且有效作用浓度极低，有些甚至在nmol浓度下就可完全抑制细菌的生长。与传统抗生素相比，抗菌肽最大的特点在于其杀菌机理是疏水性端螺旋直接插入细菌菌胞膜内而造成孔道，将细菌内容物泄出外而死亡，作用迅速，对耐药菌有效且细菌不易产生耐药性。抗菌肽在现行养殖条件下替代抗生素实验数据表明，可有效提高动物抗病能力，促进动物生长,因而抗菌肽具有广泛的应用前景，但由于抗菌肽自身的组成特点，在与其他原料混合、制粒过程中，抗菌肽的生物学活性会受到其他原料中多种微量元素、酸、外源酶等的极大影响，同时制粒过程中瞬时高温过程也会大大影响其生物学活性；另外抗菌肽在水体中易溶失，大大降低了其使用效果。

    为提高抗菌肽的稳定性，通常利用目前通用的多肽制备技术将抗菌肽制备为肠溶包衣制剂、胶囊、微丸、微乳、脂质体、微粒、纳米粒等剂型，但微乳、复乳制剂在包封率与稳定性方面较差，无法满足抗菌肽的包封要求，而脂质体的局限在于药物用量大、包封率低、稳定性不佳，也不满足抗菌肽制剂的制备要求。而肠溶包衣制剂、微粒、微囊和纳米粒又存在制备工艺复杂，成本较高，不适于大批量规模化生产的问题，同样不适用抗菌肽制剂的制备。

因此，现有技术还有待于改进和发展。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种抗菌肽制剂及其制备方法及其应用，旨在解决目前对于抗菌肽制剂制备技术包封率低，稳定性差，成本高的问题。

本发明的技术方案如下：

一种抗菌肽制剂的制备方法，其中，所述制备方法包括以下步骤：

A、将抗菌肽产生菌的菌体发酵液进行浓缩，向浓缩液中加入β环糊精、糊精、阿拉伯胶进行乳化混合5-10分钟；

B、将混合液输入高速离心喷雾干燥机进行喷雾干燥，制得半成品颗粒；

C、利用硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、丙三醇构成的包衣液在流化床包衣机中对半成品颗粒进行包衣处理，制得成品。

所述的抗菌肽制剂的制备方法，其中，所述抗菌肽产生菌为毕赤酵母重组菌 GS115/pPicZaMF57-PLE118，该抗菌肽的氨基酸序列为：     GFGCNGPWDEDDMQCHNHCKSIKGYKGGYCAKGGFVCKCY。

所述的抗菌肽制剂的制备方法，其中，所述步骤A具体为：

A1、将抗菌肽产生菌的菌体发酵液浓缩，形成固含量为30-40%的浓缩液；

A2、向浓缩液中加入质量分数10-20%的β环糊精、质量分数1-2%的糊精、质量分数5-10%的阿拉伯胶后利用高剪切乳化泵在2000-3000转/分钟的条件下混合5-10分钟。

所述的抗菌肽制剂的制备方法，其中，所述高速离心喷雾干燥机的设定条件为：雾化盘转速为3000-5000转/分钟、进风温度为140-160℃，混合液的进料量为800-1100千克/小时。

所述的抗菌肽制剂的制备方法，其中，利用震荡筛收集对喷雾干燥后形成的半成品颗粒进行筛分，控制所收集的半成品颗粒粒径范围为350-850μm。

所述的抗菌肽制剂的制备方法，其中，所述包衣液是由质量分数为80-90%的硬脂酸、质量分数9-18%的单硬脂酸甘油酯及质量分数为1-2%的丙三醇组成。

所述的抗菌肽制剂的制备方法，其中，所述步骤C具体为：

C1、将筛分合格后的半成品颗粒输入到流化床包衣机中，每次装料量为200kg；

C2、将包衣液的加热至70-100℃进行融化，并将融化好包衣液利用保温泵泵入流化床包衣机中对半成品颗粒进行包衣处理，其中，控制流化床包衣机中包衣液喷雾速度为200-300克/分钟，进风温度为16-20℃，出风温度为30-40℃。

所述的抗菌肽制剂的制备方法，其中，融化好的包衣液暂存于包衣液配料罐中，包衣处理时，通过保温泵将包衣液配料罐中的包衣液泵入流化床包衣机，其中，该包衣液配料罐在包衣处理过程中始终进行加热保温，使包衣液温度始终保持在70-80℃。

一种抗菌剂制剂，其中，所述抗菌剂制剂采用如上所述的方法制备得到。