[发明专利]一种分子探针及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种分子探针，它是标记了标记基团的多肽。本发明还公开了前述分子探针的制备方法和用途。本发明分子探针可以用于高通量筛选，相关蛋白谱的研究，靶标蛋白的鉴别，结构新颖、合理、制备方法简单，应用前景良好。

技术领域

本发明涉及一种分子探针及其制备方法和用途。

背景技术

Cbl(Casitas B-lineage lymphoma)蛋白是一类在生物体内广泛分布的细胞内蛋白，属于泛素连接酶E3系。c-Cbl在细胞内广泛表达，但主要存在于细胞质中。c-Cbl由N-端高度保守的酪氨酸激酶结合功能域(Tyrosine kinase binding domain，TKB)、环状功能域(RING)、富含脯氨酸功能域、C-端与泛素结合(Ubiquitin-associated，UBA)的功能域及与之重叠的亮氨酸拉链功能域组成。c-Cbl分子中的TKB及其他功能域可以识别并结合靶蛋白，RING功能域负责募集泛素结合酶E2，从而启动泛素化降解途径。c-Cbl通过调控信号蛋白参与细胞内信号转导的负向调控，这对于维持细胞的内稳态具有重要作用。

2型糖尿病(旧称非胰岛素依赖型糖尿病或成人糖尿病)，是一种严重的代谢性疾病，患者的主要特征为胰岛素抵抗、相对胰岛素缺乏和高血糖，常需要给予药物或胰岛素治疗，但也可通过增加体育运动和膳食控制病情。在发达国家，近年来2型糖尿病患者数迅速增加，美国疾病控制和预防中心已将2型糖尿病归入流行病之一。2型糖尿病过去在40岁以上的成年人中发病，而今越来越多的未成年人也身患此病，其原因可能是由于该年龄段的高肥胖率所致，2型糖尿病常与肥胖、高血压、高胆固醇(混合型高血脂症)以及“代谢综合征”(又称X综合症、Reavan's综合征、CHAOS综合症)相关，同时也与肢端肥大、柯兴氏综合征以及许多其他内分泌疾病相关。2型糖尿病复杂且多因素的代谢改变常导致多个器官的损伤和功能损害，其中最重要的累及部位即是心血管系统，导致患者心血管疾病发病率和死亡率显著上升，因此2型糖尿病已成为当前严重的世界性问题并引起了众多医生以及科研人员的关注，特别是对胰岛素的敏感度降低以及糖脂代谢的研究更是目前国际关注的热点之一。在过去的几十年里，一系列调控食欲、食物吸收以及增加肌肉组织或脂肪组织能量消耗的基因陆续被发现，其中c-Cbl基因就参与了全身能量消耗的调控。2004年Cooney GJ研究发现，c-Cbl在调控全身能量平衡中起着重要的作用。2006年，该组进一步发现证明c-Cbl通过调节胰岛素敏感度参与了全身能量平衡的调控以及c-Cbl泛素连接酶E3功能域参与了身体能量平衡的调控。

综上，c-Cbl蛋白功能域参与了机体能量平衡的调控，是潜在的治疗代谢性相关疾病的药物靶点，如果能成功设计出一类c-Cbl蛋白小分子探针，则将有助于鉴定和确证c-Cbl蛋白作为新的药物靶点的可能性，有助于阐明c-Cbl的某些病理生理学意义，对于治疗糖尿病、动脉粥样硬化等疾病的新型药物研发以及为靶向c-Cbl蛋白的药物研发提供科学依据和实践指导。

发明内容

本发明提供了一种可结合c-Cbl蛋白的小分子探针。

本发明分子探针，它是标记了标记基团的多肽，多肽的氨基酸序列为pfKpp，其中，p为P或者P’，f为F或F’；

所述P’的结构式为：其中，X为碳原子或杂原子，R为氢或卤素；

所述F’的结构式为：其中，R为C1-C4的烷基、卤素、氨基、硝基或N₃。

标记基团：用来做标记的物质。

P：脯氨酸；F：苯丙氨酸；K：赖氨酸。

本发明的波浪键当与立体中心连接时，波浪键表示两种立体异构体，单独或者作为混合物；同样，当与双键连接时，波浪键表示Z-异构体、E-异构体或者Z与E异构体的混合物。

优选地，所述多肽的氨基酸序列为PFKPP、P F’KPP、P’F’KPP、PF’KP’P或PF’KPP’。