[发明专利]一种利用硝酸银硅胶色谱法提纯植物来源角鲨烯的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学工程领域，具体涉及一种有工业化价值的，有效提取植物来源角鲨烯的色谱方法。

背景技术

角鲨烯常温下为无色油状液体，是一种高度不饱和的脂肪族烃类化合物。其最初是从鲨鱼的肝油中发现的，1914年被命名为Squalene，其化学名称为2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯，属于开链三萜，也称鲨烯。角鲨烯不仅具有促进新陈代谢、活化细胞、强化内脏的作用，还具有强烈的抗氧化作用，能有效防止细胞的老化和癌变，抗癌、防癌，提高机体免疫力。目前，角鲨烯主要来自于深海鲨鱼肝油，同时也少量存在于油脂不皂化物中，尤其在橄榄油、棕榈油及其脱臭馏出物种含量较多，菜籽油、大豆油、米糠油、棉籽油等植物油也含有一定量的角鲨烯。

深海鲨鱼生长周期长、繁殖率低，来源困难，因此从植物资源中中寻找角鲨烯具有重大现实意义。然而，植物来源的角鲨烯面临一个重大缺陷，角鲨烯在植物中的含量极低，大约以重量计算占比为0.1％到0.7％。因此，角鲨烯的纯化技术是植物来源角鲨烯工业化的至关重要的一环。

植物来源角鲨烯的提取方法，据检阅目前可查的文献，大致可以归纳为以下几种：一种是利用原料中角鲨烯与杂质的沸点差来进行精馏或分子蒸馏(CN 102089263A、US20130209510A1)；一种是利用萃取的方法(CN101830770A、CN102146014A)；一种是利用普通硅胶柱进行层析，得到高含量的角鲨烯(CN167005A、CN102161611A)。以上这些方法，都存在一定的局限，不适合工业化放大。

第一种方法的代表为索菲姆公司申请的CN 102089263A专利，公布了一种“植物油的脱臭馏出物和/或物理精炼冷凝物中所含的角鲨烯、甾醇和维生素E的提取方法”，本方法是采用三次相继的精馏，通过沸点差，来分离纯化角鲨烯，可现实问题在于，此方法提及的原料中角鲨烯的含量很低，大约在5％左右，而且角鲨烯的沸点与维生素E相差无几，所以这种通过三次精馏的方法，分离得到的角鲨烯不仅能耗高，而且含量也只能达到此专利中所提到的23％左右，无明显的工业化价值。

第二种方法的代表是天津大学所申请的CN101830770A专利——从植物油脱臭馏出物中提取角鲨烯的方法，则公开了一种利用分子蒸馏与萃取、结晶相结合的工艺方法，具体步骤是先将原料进行皂化反应，将萃取得到的不皂化物经过两次分子蒸馏后，以第二次蒸馏的馏出物为原料进行冷析结晶获得植物甾醇，滤液中回收角鲨烯及混合生育酚，再经多级溶剂萃取在两相中分别富集角鲨烯及维生素E。此专利提及的实施例3表明，纯化4.9g的角鲨烯粗品(含量为36.5％)，需要用到甲醇/正己烷(V正己烷：V甲醇＝1：1)50ml，接下来的三次萃取，用到75ml的正己烷和75ml的甲醇，整个萃取过程共耗用200ml的溶剂，得到2.37g角鲨烯产品(含量为68.7％)，即相当于每1g角鲨烯产品(含量为68.7％)，耗用84ml的溶剂，如此大的溶剂消耗量，基本上没有工业化价值。

第三种方法是利用硅胶柱的极性选择特性来进行角鲨烯的分离纯化，如公开号为CN167005A的中国专利——植物角鲨烯及其制备方法：具体是一种罗汉果角鲨烯的制备，先从罗汉果的种仁或种籽中提取得到角鲨烯粗品，然后通过硅胶柱层析法制得纯度达95％的罗汉果角鲨烯。中国烟草总公司广东省公司和华南农业大学共同申请的CN102161611A专利——一种以烟草为原料制备角鲨烯的方法，则是通过先用有机溶剂从烟草原料中浸取出角鲨烯粗品，然后将粗品过硅胶层析柱，洗脱液出去有机溶剂后，即得角鲨烯精品，含量为95％左右。此种方法的优点在于，所得角鲨烯产品纯度较高、溶剂可精馏后循环套用，硅胶可重复使用，但其缺陷也很明显，由于植物来源的角鲨烯原料中还有大量的油脂类物质、蜡质，其极性与角鲨烯非常接近，因此要得到高含量的角鲨烯，则上样量必然很小，而对于工业化生产来说，没有客观的上样量，就没有实际应用价值。

自1930s’Lucas和Nichols等人报道银离子可以与烯烃类(π电子)形成络合物后，研究银离子色谱分离方法的热潮历久不衰，用这种方法，可以非常方便而有效地对烯烃进行分离纯化。不过，这种方法还是主要作为一种分析手段来应用，主要原因在于以下几点：1、银离子对光非常敏感，银离子色谱法的工业化应用受到限制；2、银离子属于重金属离子，在工业化生产中有可能泄露到产品中去。所以，到目前为止，还没有见过真正使用银离子色谱作为角鲨烯工业化分离的报道。

发明内容