[发明专利]一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用

权利要求书

1.一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，所述孕甾烷生物碱类化合物分子式为C₂₈H₄₆N₂O₂，化学结构式如下：

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2.根据权利要求1所述的一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述孕甾烷生物碱类化合物的来源是从顶花板凳果干燥全草中提取获得。

3.根据权利要求2所述的一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述孕甾烷生物碱类化合物的提取方法具体步骤如下：步骤1）取顶花板凳果干燥全草15 kg，经剪碎后，加入20 L质量百分比浓度为90%的乙醇进行回流提取，共提取3次，每次2小时，合并提取液，减压回收溶剂，得浓缩的乙醇提取物；步骤2）将浓缩的乙醇提取物分散于10 L水中，用质量百分比浓度2%稀盐酸调整pH值至2，抽滤除去不能溶解物质得酸性母液；步骤3）用质量百分比浓度4%氨水调整酸性母液pH值至9，得到的碱性溶液用等体积石油醚进行萃取脱脂，而后碱水层再用等体积的氯仿萃取两次，浓缩后得氯仿萃取物即为总生物碱；步骤4）对总生物碱用氧化铝柱层析进行分离提纯，接收流份，并用硅胶薄层层析检测，收集R_f值在0.25～0.40处显示黄色斑点的流份进行ODS反相柱层析，以甲醇-水的混合溶剂洗脱，接收流份经薄层层析检测，合并含该孕甾烷生物碱类化合物的第19～26流份，减压蒸干溶剂后得浓缩物，浓缩物用甲醇溶解，再采用Sephadex LH-20凝胶柱层析除去大分子类杂质，接收流份进行薄层层析检测，合并含该孕甾烷生物碱类化合物的第15～22流份，减压蒸干溶剂后得到浓缩物，该浓缩物再采用半制备型高效液相色谱进行分离纯化，得到该孕甾烷生物碱类化合物纯品。

4.根据权利要求3所述的一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述的对总生物碱用氧化铝柱层析进行分离提纯：以氯仿-甲醇-水的混合溶剂进行梯度洗脱，取下层作为洗脱液，洗脱液的体积比依次为30:1:0、20:1:0、10:1:1、8:1:1、9:2:1、5:2:1、7:3:1和6.5:3:1，每个梯度洗脱液用量为2 L，按500 mL为1个流份接收。

5.根据权利要求3所述的一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述硅胶薄层层析检测，展开剂为15:4:1氯仿-甲醇-水混合溶剂的下层，显色剂为改良的碘化铋钾溶液。

6.根据权利要求3所述的一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述ODS反相柱层析，以甲醇-水的混合溶剂洗脱，洗脱液的体积比依次为1:2，1:1，2:1，3:2和5:1，每个梯度洗脱液用量为400 mL，按50 mL为1个流份接收。

7.根据权利要求3所述的一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述采用Sephadex LH-20凝胶柱层析除去大分子类杂质，甲醇为流动相，用量为800ml，按20 mL为1个流份接收。

8.根据权利要求3所述的一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述半制备型高效液相色谱进行分离纯化，色谱条件为：YMC-Triart C18液相色谱柱，柱高250 mm，柱半径20 mm，质量百分比浓度78%的甲醇水溶液为流动相，其中含质量百分比3%的氨水，流速8 mL/min，室温下UV-VIS检测器225 nm波长处检测，保留时间为18 min，得到孕甾烷生物碱类化合物的纯品。

9.根据权利要求1-3任一项所述的一种孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述孕甾烷生物碱类化合物在制备抗菌药物时能单独使用或与其他辅料混合，其剂型是注射剂、散剂、丸剂、胶囊剂、片剂、膜剂、膏剂、酊剂、颗粒剂或气雾剂。