[发明专利]一种唾液保存液及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种唾液保存液及其制备方法和用途，所述唾液保存液包括如下组分和含量：氯化锂0.1‑2mol/L，Tris‑HCl 1‑50mmol/L，尿素0.1‑2mol/L，SDS 0.1‑2%（w/v），EDTA 1‑10mmol/L，乙醇10‑90%（v/v），体系pH范围在7‑10之间。本发明的唾液保存液用于保存唾液，能够长期保持细胞中DNA的完整性，并且能够避免细菌等微生物的滋生。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，尤其涉及一种唾液保存液及其制备方法和用途。

背景技术

人体组织及体液中提取得到的核酸DNA样本在法医鉴定、疾病检测与治疗等领域应用广泛。当前科研人员和临床医生主要用抗凝血提取DNA，然而抗凝血保存时间稍长后出现凝集现象对提取过程造成不便。同时，通过采血提取DNA还有如下几点不便：(1)对采血人员要求有专业的培训；(2)耗费人力，需要有人辅助完成；(3)部分人心理对抽血无法接受，甚至出现晕血等状况；(4)通量低，无法大量随时随地采集样本。

近些年来，科研和医药领域逐渐采用唾液取样的方式获取个体的DNA，因为唾液里有一些口腔上皮细胞和唾液腺来源的白细胞，这些细胞里面有DNA。唾液样本采集相对于血液样本采集来讲，对个体无创伤且无痛、操作简便、便于大量采样。此外，室温条件下保存时间较长的唾液样本仍然可以提取得到完整的基因组DNA。

唾液样本中含有大量人体分泌的体液，其中包含粘蛋白、球蛋白、消化酶和白蛋白等物质，多种有机物的存在容易滋生大量的微生物，如何避免微生物的生长同时保证脱落细胞中基因组DNA的完整，成为唾液保存液的关键作用所在。

公布号为CN102440234A的中国发明专利申请公开了一种人体唾液保存固定液及其制备与应用，该唾液保存固定液以蔗糖、Tris-HCl、氯化镁、异硫氰酸胍和水为主要成分，可用于唾液保存。但是，由于含有蔗糖成分，虽然可以很好的保持该唾液保存固定液的粘度并维持细胞渗透压，但是容易引起细菌等微生物的滋生；氯化镁作为核酸酶的激活剂，容易引起DNA的降解；异硫氰酸胍作为变性剂虽可以抑制核酸酶的活性，但是容易引起细胞的破裂，使得DNA处于暴露状态，易于断裂。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种唾液保存液及其制备方法和用途，所述唾液保存液用于保存唾液，能够长期保持细胞中DNA的完整性，并且能够避免细菌等微生物的滋生。

根据本发明的第一方面，本发明提供一种唾液保存液，其包括如下组分和含量：氯化锂0.1-2mol/L，Tris-HCl1-50mmol/L，尿素0.1-2mol/L，SDS0.1-2％(w/v)，EDTA1-10mmol/L，乙醇10-90％(v/v)，体系pH范围在7-10之间。

其中，w/v表示质量体积分数，v/v表示体积分数。

在第一方面中，氯化锂以摩尔浓度计含量为0.1-2mol/L，典型但非限定性的含量例如0.12mol/L、0.15mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L、0.5mol/L、0.8mol/L、1.0mol/L、1.2mol/L、1.5mol/L、1.8mol/L、1.9mol/L、0.1-0.5mol/L、0.2-0.8mol/L、0.1-1.2mol/L、0.5-1mol/L、0.8-1.5mol/L。

在第一方面中，Tris-HCl以摩尔浓度计含量为1-50mmol/L，典型但非限定性的含量例如2mmol/L、5mmol/L、8mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、25mmol/L、32mmol/L、38mmol/L、42mmol/L、48mmol/L、1-20mmol/L、2-30mmol/L、1-42mmol/L、20-35mmol/L、10-45mmol/L。