[发明专利]一种结核分枝杆菌（TB）核酸检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学临床诊断试剂领域中的一种结核分枝杆菌（TB）核酸检测试剂盒。

背景技术

结核一直是全球最严重的公共卫生问题之一，全球有2000万人患结核病，每年新发病人数达800-1000万人，全球每年约300万人死于结核病。结核病与艾滋病、疟疾并列为影响全球健康的三大传染病杀手。我国结核病患者数量居世界第二位，年发病人数约为130万，占全球发病的14.3% 。每年因结核病死亡的人数大大超过其他传染病死亡人数的总和。2011年3月21日，卫生部发布了“全国第五次结核病流行病学现场调查结果”。其中的数据表明，中国现有超过500万名结核病活动性患者，而感染结核病菌的人数则超过5.5亿人，占全国总人口的45% 。我国对结核病的治愈率平均已达到87%以上，但对结核病的发现率约为29% 。发现率极低已成为我国有效控制结核病大规模传染的最大障碍和隐患。

目前国内常用的结核诊断手段主要有痰涂片、痰培养方法、结核菌素试验和X-光方法检测。结核菌素试验和X-光法结果易受其他疾病干扰，容易造成误判。痰涂片只有当标本中含10⁴～10⁵菌/ml时方能检出，发现率极低。而痰培养方法作为结核诊断手段的“金标准”，被广泛使用，但其耗时长（常需2个月）、操作复杂的特点，越来越为人所诟病，不利于结核的早期防治。故而需要寻求灵敏度更高，更快速的检测手段。

实时荧光定量PCR技术是在普通PCR技术之上发展起来的一项新的技术，该技术可以对靶核酸进行实时定量分析。具有很高的扩增特异性，同时检测的灵敏度也非常高。将实时荧光定量PCR技术与痰培养等诊断技术相结合可以提高对结核病诊断的灵敏度，提高结核发现率，并对结核患者的感染状态和愈后情况进行更为科学准确的评估，有利于更准确地对结核治疗药物疗效进行观察。

目前，市场上已经有多种结核分枝杆菌荧光定量检测试剂产品。但是由于结核样本存在于强碱液化过的痰液中，这些产品无法对这样复杂的的样本进行核酸提取，从而导致这些产品的检测灵敏度、准确度、特异性等技术指标较差。因此，研究开发一种能够直接从液化结核样本中直接纯化核酸的检测试剂盒，具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种结核分枝杆菌（TB）核酸检测试剂盒，该发明从根本上解决现有结核分枝杆菌（TB）核酸PCR技术存在的灵敏度低、准确性差，生物风险高等问题，其设计的TaqMan荧光探针具有灵敏度高，特异性强、稳定性好的优点，核酸DNA提取方法简单，核酸纯度高，成本较低，特别适用于结核分枝杆菌（TB）检测，便于自动化和高通量检测。