[发明专利]组合的尿钠肽检测

说明书

本申请是中国发明专利申请，申请号200980145621.6的分案申请。

交叉引用

本申请主张于2008年12月8日申请的美国临时申请，号码61/120,795的优选权，在此作为全文引用成本发明的一部分。

技术领域

本发明涉及用尿钠肽作为诊断和预后的标记物质。

背景技术

以下关于发明背景技术的讨论仅仅为了帮助阅读者更好的理解本发明，而不是对本发明的描述，也不能被认为是对本发明的现有技术的描述。

尿钠肽是一组自然产生的物质，他们存在于身体内来对抗身体内的肾脏-血管紧张素系统的活动。在最近几年，尿钠肽的测量已经引人注目地改变了心脏病的诊断和管理，包括心衰和急性冠状综合症。特别的，B型尿钠肽(BNP-human precursor Swiss-Prot人蛋白数据库P 16860)以及来源于人类前-BNP(Pro-BNP)的一些多肽都被用来诊断心衰，检测心衰的严重性和用来评估心衰的预后症状。

存在三种尿钠肽：心房尿钠肽(ANP)，B型尿钠肽(BNP)和C型尿钠肽(CNP)。成熟的人类的B型尿钠肽(BNP)(又称为脑钠肽)具有32个氨基酸，分子量为4千道尔顿(4 kDa)的氨基酸序列，它主要参于尿钠肽系统中来调节血压和体液平衡(Bonow,R.O.,Circulation 93:1946-1950,1996)。BNP的前体由108个氨基酸分子的合成，称为前体BNP(Pro-BNP),它可以被水解成带有氮末端的76个氨基酸(氨基酸1-76)，称为NT-proBNP，和32个成熟32-氨基酸，称为尿钠肽(BNP-32)或尿钠肽32(氨基酸77-108)。已经表明NT-pro-BNP,BNP-32,和BNP前体(pre-pro-BNP)以及它们的一些片段可以在人类的血清中循环。参见(Tateyama et ah,Biochem.Biophys.Res.Commun.185:760-7,1992；Hunt et ah,Biochem.Biophys.Res.Commun.214:1175-83,1995)；以及国际专利公开号码WO04/094459和WO04094460,它们中的每一个都被全部引入到本申请作为本发明的一部分。另外，BNP1-108和BNP77-108的第一位置的2个残基可以通过水解或蛋白水解去掉，从BNP的前体(proBNP)生成BNP3-108分子，从NT-proBNP生成BNP3-76分子，从BNP生成BNP79-108分子。检测和可以特异结合这些断列的构体的抗体可以被产生；例如，检测可以测定BNP3-108，而不能测定proBNP(BNP1-108)；检测可以测定BNP3-76但是不能测定NT-proBNP(BNP1-76)；和检测可以测定BNP79-108，而不能测定BNP77-108。

人类108个氨基酸的BNP前体proBNP(BNP1-108)的序列如下，下画线为成熟的BNP(BNP77-108)序列

HPLGSPGSAS DLETSGLQEQ RNHLQGKLSE LQVEQTSLEP LQESPRPTGV 50WKSREVATEG IRGHRKMVLY TLRAPRSPKM VQGSGCFGRK MDRISSSSGL 100

GCKVLRRH        108

(序列1).

BNP1-108由更大的前体pre-pro-BNP合成，该前体的序列如下(“前体”的学列序列为粗体字母表示)：

HPLG SPGSASDLET SGLQEQRNHL 50

QGKLSELQVE QTSLEPLQES PRPTGVWKSR EVATEGIRGH RKMVLYTLRA 100

PRSPKMVQGS GCFGRKMDRI SSSSGLGCKV LRRH    134

(序列2).