[发明专利]一种天然产物中铁螯合物的分离纯化方法在审
| 申请号： | 201410352810.3 | 申请日： | 2014-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN104232711A | 公开（公告）日： | 2014-12-24 |
| 发明（设计）人： | 杨兆勇;刘娟娟;生宁;田喜凤;冯晓洲;孙婉;李亚东;汪康游;金媛媛 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院医药生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C07K7/06;C07K1/16;C12R1/465 |
| 代理公司： | 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 | 代理人： | 杨厚;王为 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 天然 产物 中铁螯合物 分离 纯化 方法 | ||
1.一种链霉菌代谢产物中分离纯化获得铁螯合物的方法，其特征是，所述方法涉及的链霉菌选自白霉素产生菌，具体方法包括以下步骤：
白霉素产生菌ATCC700974的培养；
所述培养液的初步处理；
铁螯合物的初步分离；
所述螯合物的纯化；
所述螯合物纯品的检测鉴定。
2.权利要求1所述的方法，其特征是，白霉素产生菌ATCC700974经平板培养，接种到液体培养基，28℃摇床培养72h，pH值至7.0，添加一定量FeSO4·7H2O，继续培养72h。
3.权利要求1所述的方法，其特征是，白霉素产生菌ATCC700974培养液经离心、上清过大孔树脂，冲洗后，再用40％丙酮洗脱，收集呈红棕色洗脱液，将收集液进行旋蒸，去除丙酮，然后将其冷冻干燥。
4.权利要求1所述的方法，其特征是，铁螯合物的初步分离，是将冻干粉末用少量水溶解，采用分子筛色谱柱，用水洗脱，收集OD435nm值为最大的洗脱液部分，冷冻干燥得粗品。
5.权利要求1所述的方法，其特征是，铁螯合物的纯化，是将冻干粗粉末，用少量水溶解，用制备液相，95％2mM乙酸铵-70％乙腈流动相，收集保留时间为6.7～6.9min，435nm吸收峰的洗脱液，进行旋蒸、除去乙腈，再冷冻干燥，获得铁螯合物纯品。
6.权利要求1所述的方法，其特征是，铁螯合物纯品的检测鉴定，是采用HPLC、紫外光谱和质谱，分别检测铁螯合物纯品的HPLC435nm吸收峰，保留时间为8.7min左右，紫外吸收435nm，质谱分析显示其分子量为587m/z。
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