[发明专利]一种中空容器内表面微生物的取样方法和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中空容器内表面微生物的取样方法和检测方法。

背景技术

食品包装的安全性直接影响着包装内食品的质量。针对非在线生产的用于直接灌装的中空食品包装而言，在存储、运输过程中存在着被污染的风险，从而会影响食品的安全性以及货架期。

目前我国关于一次性餐饮具微生物的取样方法，基本参照《GB18006.1-2009塑料一次性餐饮具通用技术要求》。该标准适用于宾馆、饭店、餐厅、食堂等餐饮企业的食(饮)具，也适用于个体摊点的食(饮)具。一次性餐饮具定义为预期用餐或类似用途的餐具，包括一次性使用的餐盒、盘、碟、刀、叉、筷子、碗、杯、罐、壶、吸管等，也包括有外托的一次性内衬餐具，但不包括无预期用餐目的或类似用途的食品包装物如生鲜食品托盘、酸奶杯、果冻杯等。GB18006.1-2009中微生物指标中的大肠菌群检验是参照GB14934-94进行的、霉菌计数按GB/T4789.15进行。

对于诸如酸奶桶等中空容器内表面的微生物取样方法，由于没有相关的法律规定，公立的第三方检测机构基本是按照《GB18006.1-2009塑料一次性餐饮具通用技术要求》中的发酵法进行微生物取样。该方法具体是将2.0cm×2.5cm灭菌滤纸片紧贴内面各10张(总面积50cm²)，经1min，按序取下滤纸片置入50mL灭菌水试管中，充分振荡后，制成原液。这样的取样方法，对于中空容器来说，操作起来不方便，给取样造成困难。市场上也难以买到现成的无菌滤纸片。工业上使用的中空容器大多是小口中空容器，取样难度非常大。而且，发酵法仅仅对容器局部进行取样，并不能全面地反映整个容器内部的污染状况，其结果是片面的。相对于恶劣环境的下制造、运输及保存，在空气净化级别在10万级及以上的环境条件下，采用发酵法对中空容器进行微生物取样所带来的片面性会更加严重。

同样，一些企业会使用膜过滤法进行样品微生物取样和检测。膜过滤法是用体积为样品容量1/3的无菌水涮洗容器内表面，振荡后取得样本液，经过抽真空阀，通过孔径为0.45μm的滤膜，将水分抽掉，使微生物保留在滤膜上，并对滤膜片进行培养，查看菌落数量的方法。膜过滤法虽然精确，但该方法更适用于10万级洁净度及以上的环境条件下运输、存储的产品，对污染严重的样品，菌落过多，会将滤膜堵塞，导致无法读数，且其检测所需的设备、耗材等，价格都比较昂贵，不适合于工厂大规模的长期检测。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，为了克服现有的中空容器内表面微生物取样和检测方法操作困难、不能全面反映整个容器内表面微生物污染状况以及成本较高、方法适用范围有限、不利于工业化应用的缺陷，而提供了一种中空容器内表面微生物的取样方法和检测方法。本发明的中空容器内表面微生物取样及检测方法操作简单、能全面反映整个中空容器内表面微生物污染状况、成本低廉、方法适用范围广泛、利于工业化应用。

本发明提供了一种中空容器内表面微生物的取样方法，其包括如下步骤：在无菌环境下，将无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液置于所测容器中，所述的无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的体积为所测容器额定容量的30％～35％；用无菌盖将所测容器的口封住，振荡所测容器，使所测容器内水溶液充分涮洗到容器所有内表面，并充分混匀，振荡后所得溶液即为取样的样本液；所述的中空容器的口径面积为小于或等于100平方厘米。

所述的无菌环境一般为无菌室中。

所述的振荡的方法可为本领域常规各种方法，可依据容器大小和重量选择不同的振荡方法，优选人工振荡和机械振荡。所述的机械振荡优选用摇床振荡。

所述的中空容器的口径面积优选小于或等于90平方厘米，更优选小于或等于50平方厘米，最优选小于或等于20平方厘米。

所述的中空容器的材质优选为塑料、玻璃、金属或陶瓷，更优选为塑料或玻璃。所述的塑料优选为聚乙烯、聚丙烯或聚对苯二甲酸乙二醇酯塑。

所述的无菌生理盐水优选为0.85％的无菌氯化钠水溶液，百分比为氯化钠质量相对于水溶液中水的质量的质量百分比。所述的无菌生理盐水更优选为按照《GB4789.2-2010食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中无菌生理盐水的配制方法进行配制所得的水溶液，所述的配制方法的步骤为：称量8.5g氯化钠和1000mL蒸馏水，然后将两者混合溶解后于121℃高压灭菌15min。