[发明专利]一种鉴定大豆细胞核雄性不育系的分子标记及其鉴定方法有效
| 申请号： | 201410328901.3 | 申请日： | 2014-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN104131012B | 公开（公告）日： | 2017-02-08 |
| 发明（设计）人： | 王晓波;邱丽娟;李冬冬;马元山;张浩伟;高雅丽;张文明 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 安徽汇朴律师事务所34116 | 代理人： | 汪蕙 |
| 地址： | 230001 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴定 大豆 细胞核 雄性不育 分子 标记 及其 方法 | ||
1.一种鉴定大豆细胞核雄性不育系的分子标记，其特征在于，所述分子标记具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。
2.一种利用如权利要求1所述的分子标记鉴定大豆细胞核雄性不育系的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取大豆植物组织基因组DNA，以所述分子标记的核苷酸序列为模板设计引物，进行PCR扩增，获得扩增片段；
(2)若上述步骤(1)中能够获得所述分子标记的核苷酸序列，则上述步骤(1)的大豆为细胞核雄性不育系大豆；若不能，则为细胞核雄性可育系大豆。
3.根据权利要求2所述的一种利用分子标记鉴定大豆细胞核雄性不育系的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，引物的核苷酸序列为：
上游引物：SEQ ID NO：2：5’GTTAGGTGGGTAGGTGAG3’；
下游引物：SEQ ID NO：3：5’ACATAGTGTCGGAGTGG3’；
所述步骤(2)中，若能够获得长度为1239bp的扩增片段，则所述大豆为雄性不育系大豆，若不能获得长度为1239bp的扩增片段，则为雄性可育系大豆。
4.根据权利要求2所述的一种利用分子标记鉴定大豆细胞核雄性不育系的方法，其特征在于，所述步骤(1)的PCR扩增程序为：95℃预变性5min，95℃变性30s，起始退火温度58℃，以后每循环降低0.3℃，退火时间为40s，72℃延伸90s，设38个循环，最后72℃继续延伸15min。
5.根据权利要求2所述的一种利用分子标记鉴定大豆细胞核雄性不育系的方法，其特征在于，所述步骤(1)的大豆植物组织选自叶片、根尖、种子和种皮中的一种。
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