[发明专利]一种微生物发酵产苯丙氨酸的方法

权利要求书

1.一种生产L-苯丙氨酸的发酵方法，包括菌种活化、种子培养、发酵培养，其特征在于，还包括多阶段指数L-酪氨酸补料策略。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括发酵培养基中氮源的优化。

3.根据权利要求1-2所述的方法，其特征在于，发酵的菌株为大肠杆菌BL21(pET/P-aspC)。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的多阶段指数L-酪氨酸补料策略具体步骤如下：发酵12 h后开始补加L-酪氨酸；12-32 h维持菌体比生长速率在0.08 h^-1  ；32-52 h，维持菌体比生长速率为0.05 h^-1；52-72 h, 维持菌体比生长速率为0.02 h^-1。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，初始L-酪氨酸浓度为0-2.4 g/L，优选的为0.3-1 g/L。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的氮源优化包括对发酵培养基中硫酸铵浓度和有机氮源种类的优化。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的硫酸铵的浓度为0-30 g/L，优选的在5 g/L以下。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的有机氮氮源的优化为单一有机氮源优化，其种类及其浓度为酵母粉10g/L、玉米浆干粉11.5g/L、棉籽饼粉10g/L、豆饼浸粉7.9 g/L、蛋白胨9.2g/L。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的有机氮氮源的优化为复合有机氮源优化，其种类及其浓度为酵母粉5g/L和玉米浆干粉5.75g/L，蛋白胨4.6g/L和玉米浆干粉5.75g/L，酵母粉5g/L和蛋白胨4.6g/L，优选的，为酵母粉和玉米浆干粉复合有机氮源。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述有机氮源的总氮量是相当，并且复合有机氮源中两个单一有机氮源是按其含氮量1:1添加。