[发明专利]一种米渣蛋白的糖基化改性方法有效
申请号: | 201410266430.8 | 申请日: | 2014-06-16 |
公开(公告)号: | CN104004812A | 公开(公告)日: | 2014-08-27 |
发明(设计)人: | 梁盈;林亲录;鲁倩;刘颖;吴伟;杨涛;吴跃 | 申请(专利权)人: | 中南林业科技大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/107 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 郭立中 |
地址: | 410004 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 糖基化 改性 方法 | ||
技术领域
本发明属疏水性植物蛋白的改性研究领域,具体涉及一种米渣蛋白的糖基化改性方法。
背景技术
稻谷是我国第一大作物粮食,总产量长居世界第一。长期以来,稻谷生产及其副产物的深加工一直备受食品科学研究者的高度关注。目前,米渣主要是用来作为动物饲料,而从米渣中提取的米渣蛋白在食品工业中应用逐渐广泛。米渣蛋白的开发和利用研究正是基于丰富稻米加工产品和合理利用稻米加工副产品的研究和综合利用。米渣蛋白中75%-80%是谷蛋白,其氨基酸组成与大米蛋白基本一致。谷蛋白[5]的氨基酸组成平衡合理,其中赖氨酸含量高于其他谷类,精氨酸含量也较高,是其他植物蛋白甚至很多动物蛋白所无法比拟的。米渣蛋白是高疏水性植物蛋白的代表,由于其溶解性较差,不能在水中与其他物料形成均匀的体系,影响了米渣蛋白在溶液体系中的应用,另外其较差的溶解性也会导致其稳定性、乳化性、发泡性等性能不佳,目前其应用基本限于饲料。因此如何降低以谷蛋白为主的米渣蛋白的疏水性已成为拓展其应用价值的研究热点。
多糖是指由一个以上单糖通过糖苷键连接的聚合物,除作为植物的贮藏养料和骨架成分外,有些植物体内的多糖类化合物还具有抗肿瘤、抗心血管疾病、抗衰老等生理活性。多糖是重要的高分子化合物,但因其单糖的组成种类和连接位置复杂,异头碳的构型不同,加大了研究难度,发展比蛋白质和核酸晚。近年由于多糖类化合物的特殊生理活性,糖复合物和多糖类化合物的研究有了快速发展。
从目前所报道的文献来看,蛋白质与还原糖通过美拉德反应进行接枝改性的方法主要有干法和湿法两种。目前国外已被研究过的糖基化改性蛋白质多为乳清蛋白、β-乳球蛋白、牛血清蛋白、酪蛋白、溶菌酶,也有小麦面筋蛋白和大豆分离蛋白,并发现其共聚物具有优良的乳化特性。国内在这方面的工作起步较晚,对于改善疏水性植物蛋白功能领域的研究大多集中在大豆蛋白,对于增溶和功能特性改善需求更为迫切的谷物蛋白质,尤其是米渣蛋白来说,其研究则较少。江南大学研究则是用单糖对大米蛋白进行糖基化改性,且改性后其功能性质的改变也仅仅体现在溶解性、乳化性、起泡性等方面。
发明内容
本发明旨在克服现有技术的不足,提供一种米渣蛋白的糖基化改性方法。
为了达到上述目的,本发明提供的技术方案为:
所述米渣蛋白的糖基化改性的方法包括如下步骤:
(1)用80~90℃水洗米渣,按115~125 U/g的量向米渣中加入耐高温α-淀粉酶,在pH4~5 、80~90℃条件下酶解0.5~1.5h,降解残留淀粉;灭酶后,按1100~1300 U/g的量向米渣中加入碱性蛋白酶,在pH 7.5~8.5、40~50℃条件下预酶解1.5~2.5h,再用质量百分比浓度为1%的 NaOH调节pH 为11~12后于40~50℃碱提1.5~2.5 h,碱提时的液固比为8~12:1,得米渣蛋白质,米渣蛋白质提取率可达到60.71%,纯度达90.46%;
(2)将1g步骤(1)所得的米渣蛋白质溶于100mL蒸馏水,调节pH值为10~11,优选11,搅拌后冷却至室温备用;
(3)将多糖加入步骤(2)制备的米渣蛋白质溶液中,多糖与米渣蛋白质的质量比为3.5~5.5:1,优选5:1;调节pH为10~11,优选11,搅拌后干燥,优选冷冻真空干燥,即得具有优良抗氧化活性的糖基化改性后的米渣蛋白。
优选的,步骤(1)是用90℃水洗米渣,按120 U/g的量向米渣中加入耐高温α-淀粉酶,在pH4.5 、90℃条件下酶解1h,降解残留淀粉;灭酶后,按1200 U/g的量向米渣中加入碱性蛋白酶,在pH 8,45℃条件下预酶解2h,再用质量百分比浓度为1%的 NaOH调节pH 为12后于45℃碱提2 h,碱提时的液固比为10:1,得米渣蛋白质。
其中,所述多糖为具有调节免疫、抗肿瘤、抗心血管疾病、抗氧化等生理活性功能的多糖,如葡聚糖、南瓜多糖或香菇多糖。
本发明以具有丰富资源的米渣为原料制备得到的低敏性、高生物价、高营养价值的米渣蛋白为基础,采用具有调节免疫、抗肿瘤、抗心血管疾病、抗衰老等生理活性的多糖为糖基供体,以美拉德反应原理为理论基础,进行米渣蛋白-多糖的复合反应。
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