[发明专利]一种静脉注射用乙型肝炎人免疫球蛋白的制备工艺

权利要求书

1.一种静脉注射用乙型肝炎人免疫球蛋白的制备工艺，其特征是制备工艺如下：

（1）血浆融化：将乙型肝炎表面抗体效价≥8IU/ml的原料血浆于0~4℃融化；

（2）组分分离：将步骤（1）中血浆用质量百分含量为0.85%的氯化钠溶液稀释血浆至蛋白质含量为4.5%~5.5%，调节pH值至7.0，加入95%乙醇至反应液乙醇浓度为25%，控制反应液温度在-2~-3℃，压滤，所得组分Ⅰ沉淀；

（3）辛酸沉淀：将步骤（2）中组分Ⅰ沉淀用2倍量的0.06M醋酸盐缓冲液溶解，再用1mol/L醋酸调节pH至4.8，缓慢加入辛酸或辛酸盐沉淀，过滤收集滤液；

（4）第一步层析：将步骤（3）中滤液用磷酸盐缓冲液调节为pH6.2，加入阴离子交换层析柱纯化，得流穿液；

（5）沉淀：将步骤（4）中得到的流穿液电导率调节为1200us/cm，pH为6.0~6.5，压滤，收集压滤液；

（6）S/D灭活：将步骤（5）中得到的压滤液加入10%S/D溶液搅拌，得到混合液，将混合液移入灭活罐，搅拌升温至24~26℃，放置24小时；

（7）第二步层析：将步骤（6）中得到的混合液加入用平衡液预平衡好的DEAE-Sephadex A-50凝胶柱，吸附1小时以上，收集凝胶，然后用洗脱液洗脱凝胶5次，收集洗脱后的蛋白洗脱液；

（8）成品配制：将步骤（7）中的蛋白洗脱液过滤、澄清、超滤、透析，用1mol/L盐酸调节pH3.8~4.4，乙型肝炎表面抗体效价≥100IU/ml，加麦芽糖使麦芽糖含量为10±1%，过滤除菌，分装。

2.如权利要求1所述的一种静脉注射用乙型肝炎人免疫球蛋白的制备工艺，其特征在于：步骤（7）的具体工艺为：①预处理：DEAE-Sephadex A-50凝胶柱用0.5mol/L NaOH浸泡2小时，然后用注射用水冲洗至中性；②平衡：将平衡液加入凝胶柱中，平衡液为0.15mol/L的NaCl；③洗脱：通过将洗脱液加入凝胶中来洗脱凝胶上吸附的蛋白，洗脱液为0.50 mol/L的NaCl。

3.如权利要求1所述的一种静脉注射用乙型肝炎人免疫球蛋白的制备工艺，其特征在于：制备的乙型肝炎人免疫球蛋白的规格为500IU/瓶、2000IU/瓶、2500IU/瓶、5000IU/瓶。