[发明专利]一组糖基转移酶及其应用

权利要求书

1.一种体外糖基化方法，其特征在于，包括步骤：

在糖基转移酶存在下，将糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的以下位点上：

C-3位上；

从而形成糖基化的四环三萜类化合物；

其中，

所述的糖基转移酶选自：

如SEQ ID NOs.:22和24所示的糖基转移酶，且

所述的四环三萜类化合物选自下组：

原人参二醇、20(R)-原人参二醇、人参皂苷CK、原人参三醇、人参皂苷F1、达玛烯二醇、25-OH-原人参二醇、25-OCH3-原人参二醇、羊毛甾醇、Ganoderic acid C2、Agladupol A、Hispidol B和24(R)-Cycloartane-3beta,24,25-triol；或

所述的糖基转移酶选自：

如SEQ ID NOs.:41所示的糖基转移酶，且

所述的四环三萜类化合物选自下组：

原人参二醇(PPD)、原人参三醇(PPT)、25-OH-原人参二醇、Hispidol B和24(R)-Cycloartane-3beta,24,25-triol；或

所述的糖基转移酶选自：

如SEQ ID NOs.:43所示的糖基转移酶，且

所述的四环三萜类化合物选自下组：

原人参二醇(PPD)、人参皂苷CK、25-OH-原人参二醇和Hispidol B；或

在糖基转移酶存在下，将糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的以下位点上：

C-3的第一个糖基上；

从而形成糖基化的四环三萜类化合物；

其中，

所述的糖基转移酶选自：

如SEQ ID NOs.:26、28、55、57、59和61所示的糖基转移酶，且所述四环三萜类化合物为人参皂苷F2；或

所述的糖基转移酶选自：

如SEQ ID NOs.:26、28、和59所示的糖基转移酶，且所述四环三萜类化合物为人参皂苷Rh2；

且所述的糖基供体包括UDP-葡萄糖、UDP-乙酰基葡萄糖、UDP-木糖、或UDP-鼠李糖。

2.一种分离的多肽，其特征在于，所述多肽能够将糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的C-3第一个糖基上，所述的多肽选自下组：

(a)如SEQ ID NOs.:26、28、55、57、59、或61中任一条所示氨基酸序列的多肽；

(b)将SEQ ID NOs.:26、28、55、57、59、或61添加信号肽序列后形成的、并具有糖基转移酶活性的多肽。

3.如权利要求2所述的分离的多肽，其特征在于，所述的多肽为SEQ ID NOs.:26、28、55、57、59、或61所示氨基酸序列的多肽。

4.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸为选自下组的序列：

(A)编码权利要求2所述多肽的核苷酸序列；

(B)编码如SEQ ID NOs.:26、28、55、57、59、或61中任一条所示多肽的核苷酸序列；

(C)如SEQ ID NOs.:25、27、54、56、58、或60中任一条所示的核苷酸序列；

(F)与(A)-(C)任一所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。

5.如权利要求4所述的分离的多核苷酸，其特征在于，所述的核苷酸的序列如SEQ IDNO.:25、27、54、56、58、或60所示。

6.如权利要求4所述的分离的多核苷酸，其特征在于，所示的多核苷酸编码的氨基酸序列分别如SEQ ID NOs.:26、28、55、57、59、或61所示，且所述的核苷酸的序列分别如SEQ IDNOs.:25、27、54、56、58、或60所示。

7.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求4所述的多核苷酸。