[发明专利]C-BF保护小鼠及人结肠癌上皮细胞系溃疡性结肠炎综合模型无效
申请号: | 201410208089.0 | 申请日: | 2014-05-16 |
公开(公告)号: | CN104046592A | 公开(公告)日: | 2014-09-17 |
发明(设计)人: | 汪以真;张海文;戎亦骊 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;A01K67/027;A61D7/00 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 林松海 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | bf 保护 小鼠 结肠癌 上皮 细胞系 溃疡性 结肠炎 综合 模型 | ||
1.一种抗菌肽C-BF保护小鼠及人结肠癌上皮细胞系溃疡性结肠炎综合模型,其特征在于,
1)对于小鼠,建立3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎模型;小鼠直肠注射C-BF的PBS溶液,每天一次,C-BF的剂量是5mg/kg,注射持续1周,实验期每天称重记录体重数据,并观察小鼠直肠出血,粪便成型情况;
2)对于Caco-2细胞,培养基中抗菌肽C-BF的浓度为25ug/ml,抗菌肽处理Caco-2细胞24h后用3%DSS处理24h。
2.根据权利要求1所述的抗菌肽C-BF保护小鼠及人结肠癌上皮细胞系溃疡性结肠炎综合模型,其特征在于,进一步,
3)对于小鼠,荧光标记C-BF,浓度为2mg/ml,直肠注射,通过活体成像、HE染色、免疫荧光、免疫组织化学、流式细胞仪、Tunnel、ELISA、利用细胞电阻仪对跨上皮电阻值进行测定、western-blot、实时荧光定量PCR技术方法;
4)对于Caco-2细胞,利用细胞电阻仪对跨上皮电阻值进行测定,Western-blot、实时荧光定量PCR技术方法;
5)综合体内小鼠实验和体外细胞实验,评价C-BF在缓解炎症、降低细胞凋亡水平以及改善肠道屏障功能的作用。
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