[发明专利]一种培养基及用该培养基生产多成分高活性灵芝菌粉方法

说明书

技术领域

本发明属于生物深层发酵技术领域，具体涉及一种多成分高活性灵芝及灵芝菌粉的制备方法。

背景技术

灵芝：治愈万症，其功能应验，灵通神效，故名灵芝，又名“不死药”俗称“灵芝草”，多孔菌科类、一年生真菌，灵芝作为药物已正式被国家药典收载，同时它又是国家批准的新资源食品，无毒副作用，可以药食两用。科学研究表明，灵芝的药理成分非常丰富，其中有效成份可分为十大类，包括灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、16种氨基酸（其中含有七种人体必需氨基酸）、蛋白质、甾类、甘露醇、香豆精苷、生物碱、有机酸（主含延胡索酸），以及微量元素Ge、P、Fe、Ca、Mn、Zn等。灵芝对人体具有双向调节作用，所治病种，涉及心脑血管、消化、神经、内分泌、呼吸、运动等各个系统，尤其对肿瘤、肝脏病变、失眠以及衰老的防治作用十分显著。

通过生物发酵的方式提高灵芝药用活性成分的含量因为其具有生产周期短、节省劳动力和受外部环境影响小等优点被认为是一种有效的方法。但目前国内外对灵芝的研究主要集中在发酵条件及活性成分分离等层面上，整体发酵水平不高，如专利（申请号00111953.2）公开了一种液体发酵法同时生产灵芝多糖和灵芝酸的工艺，灵芝酸含量可达2.8mg/100mg，胞内和胞外多糖总量高达2.34克/升，但该方法效率低，不能满足工业化发酵生产的需要；而专利（申请号201210110969.5）虽然公开了一种利用扩张蛋白提高灵芝菌丝体中总黄酮产量的方法，即通过向液体发酵培养基中加入扩张蛋白来提高总黄酮的产量，但此专利中所用的扩张蛋白液制备方法繁复，不利于工厂化生产。

发明内容

本发明提供一种简单易行且成本低的利用具有天然活性成分的灵芝菌，通过培养基的选择，经液体深层发酵、生物转化合成含有高比率黄酮类化合物和皂角苷活性成分的灵芝菌粉的方法，具体技术方案如下。

本发明提供了一种深层发酵生产多成分高活性灵芝菌粉的培养基，所述培养基每升中含有大米粉1-5g，马铃薯汁1-40 g，山葡萄籽粉1-6 g，人参粉1-2 g，杏仁粉1-3 g，枸杞子粉1-3 g，山楂汁1-4 g，银杏叶1-5 g，磷酸二氢钾0.1-0.5 g，硫酸镁0.1-0.5 g，葡萄糖1-5 g，其余为水，PH值自然。

优选地，本发明提供的培养基每升中含有大米粉1-5g，马铃薯汁1-10 g，山葡萄籽粉1-3.5 g，人参粉1-1.5 g，杏仁粉1-1.2g，枸杞子粉1-2.5g，山楂汁1-2.5g，银杏叶1-2.5g，磷酸二氢钾0.1-0.5g，硫酸镁0.1-0.25g，葡萄糖1-3g，其余为水，PH值自然。

基于上述的培养基，本发明提供了深层发酵生产多成分高活性灵芝的方法，主要包括如下步骤：

1）将灵芝菌种在斜面培养基上培养得到斜面菌种；

2）将斜面菌种接种到液体种子培养基中，进行扩繁培养，得到液体种子；

3）将步骤2）得到的液体种子按0.5-1%的接种量接种到一级种子罐的培养基中培养得到一级种子液；

4）将步骤3）得到的一级种子液按5-10%的接种量接种到上述权利要求所述的培养基中，在条件为温度25-27℃，压力0.03-0.05MPa，空气流量1：0.5-1.0v/v,菌丝浓度40-55w/v的条件下，深层发酵培养56-72h，得到发酵液；

5）将步骤4）得到的发酵液经过滤得到灵芝湿菌丝体和过滤液，湿菌丝体干燥后研磨得到灵芝菌粉；过滤液经真空浓缩干燥后研磨得到灵芝菌粉。

优选地，在上述深层发酵生产多成分高活性灵芝的方法中，步骤1）所述的斜面培养基为PDA培养基，斜面培养的条件为：在温度为22-25℃的条件下，培养5-7天。

优选地，在上述深层发酵生产多成分高活性灵芝的方法中，步骤2）所述液体种子培养基为PDA培养基，培养条件为在22-25℃的温度下，摇床转数为100-120转/min，暗培养3-5天。

优选地，在上述深层发酵生产多成分高活性灵芝的方法中，步骤3）所述一级种子罐培养基为综合培养基，培养条件为在25-27℃的温度下，培养48h。

目前，由于野生灵芝资源有限，而通过人工栽培获得的灵芝实体所带来的农药及污染很难去除。发酵法可以通过调节培养基的组成、培养温度及时间等条件，在短时间内得到大量的灵芝菌丝体，其在组成上与人工栽培得到的灵芝实体相似，但其克服了污染及农药问题。