[发明专利]利用铜离子特异性DNA和SYBR Green I荧光法检测铜的方法有效
申请号: | 201410183078.1 | 申请日: | 2014-05-02 |
公开(公告)号: | CN103940797A | 公开(公告)日: | 2014-07-23 |
发明(设计)人: | 周培;詹深山;徐涵楚;詹学佳;张暐霖;吕晶 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人: | 王毓理;王锡麟 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 离子 特异性 dna sybr green 荧光 检测 方法 | ||
1.一种利用铜离子特异性DNA和SYBR Green I荧光法检测铜的方法,其特征在于,通过含有铜离子特异性DNA的检测液制备得到标准铜离子检测体系,通过与空白对照液共同检测荧光强度后制成浓度‐相对荧光强度标准曲线;最终在检测时通过将待测水样置于含有铜离子特异性DNA的检测液中,经检测荧光强度并对照标准曲线实现铜离子浓度的检测;
所述的铜离子特异性DNA,即Cu100序列为:(5'‐GATTGCACTTACTATCTCGATGAAGAAGTACCCGGAGCGACGTTGGTTGTTCTGTAAAATTGAATAAGCT GGTATCTCCCTATAGTGAGTCGTATTACC‐3')。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征是,所述的标准铜离子检测体系是指:在若干支所述检测液中加入已知且不同浓度铜标准液后,进一步加入DNA嵌入剂SYBR Green I。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征是,所述的空白对照液是指:在所述检测液中仅加入DNA嵌入剂SYBR Green I。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征是,所述的检测荧光强度是指:采用石英荧光用比色皿,用荧光光度计进行扫描测定信号,并记录标准铜离子检测体系中的浓度铜CCu与其对应的相对荧光强度Q=[F0‐F]/F0,其中:F和F0分别为标准铜离子检测体系和空白对照液的荧光光谱信号。
5.根据权利要求1或4所述的方法,其特征是,所述的检测荧光强度的方式具体为:以激发光狭缝为10nm,发射光狭缝为10nm,激发光波长为490nm条件下扫描,获得其荧光信号光谱。
6.根据权利要求2所述的方法,其特征是,所述的不同浓度是指6~600ppb。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征是,所述的标准铜离子检测体系在25℃条件下避光孵育。
8.根据权利要求1或4所述的方法,其特征是,所述的浓度‐相对荧光强度标准曲线为:Q=0.307CCu+5.595。
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