[发明专利]一种预测甲状腺肿瘤良恶性的试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种预测甲状腺肿瘤良恶性的试剂盒。

背景技术

甲状腺癌是最常见的内分泌肿瘤，约占内分泌系统肿瘤的86.8％，且恶性甲状腺结节的发病率逐年上升，其上升幅度居于所有癌症之首。由于甲状腺结节大部分为良性病变，恶性结节仅占约5-7.7％，且良、恶性结节治疗方法及愈后不同，因此临床诊断的首要目的是术前确定甲状腺结节的良、恶性，制定合理的个性化治疗方案，以减少不必要的甲状腺切除手术所造成的患者额外的经济负担及术后并发症，合理配置医疗资源，提高患者生活质量。

目前临床用于诊断良、恶性甲状腺结节的方法主要有超声、计算机断层成像(CT)、核磁共振成像(MRI)及超声引导下的甲状腺细针穿刺细胞学检查等。细针穿刺细胞学检查是目前评估甲状腺结节最为准确、有效和经济的方法。但是大量研究表明，约15-30％的细针穿刺细胞学检查结果报告为“无法诊断”且即使复查细针穿刺细胞学检查也有20-58％的结果仍然报告为“无法诊断”。该部分病人在随后进行的甲状腺切除手术后，对切除组织进行病理分析，甲状腺结节的良性率仍占70～80％，也就是说大部分病人因无法得到较为准确的术前诊断而进行了不必要的探查性手术。这不仅增加了该部分病人术后各种并发症的风险，造成我国原本紧张的医疗资源的浪费，更增添了相当一部分病人额外的经济负担。此外，由于该诊断方法对于细针穿刺操作医师以及病理读片医师均有较高要求等，均限制其在良恶性甲状腺结节术前诊断中的常规应用。因此，临床需要更为简便、经济、准确的用于术前诊断良、恶性甲状腺结节的实验室检测方法。

随着生物信息学和基因芯片技术的发展，甲状腺细针穿刺物或组织样本通过基因表达芯片检测技术以及生物信息学分析以术前预测良、恶性甲状腺结节已具有较好的预测性能。Alexande等通过基因表达谱差异，鉴定出167个差异基因，并采用支持向量机的方法对细胞学鉴定结果可疑的细针穿刺样本进行预测，其预测敏感性可达92％。但通常良、恶性甲状腺结节间差异表达的基因至少有几十甚至上百个，且基因芯片平台测试具有成本高、操作复杂、实验数据可重复性差等特点。若将该技术应用与临床常规对于甲状腺结节良恶性的判别诊断，不仅大大增加了病人不必要的经济负担，且其较为复杂的实验步骤及芯片平台的建立不便于临床实验室日常检测工作的开展。因此，临床工作者急需简便、高效、易于标准化且有较好预测性能的甲状腺术前诊断试剂盒以协助良、恶性甲状腺结节的鉴别诊断。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，针对目前甲状腺肿瘤术前预测良恶性准确率较低的缺陷，提供一种预测甲状腺肿瘤良恶性的试剂盒，该试剂盒即能以较高的准确度预测甲状腺肿瘤的良恶性。

本发明解决上述技术问题的技术方案为：一种预测甲状腺肿瘤良恶性的试剂盒，它含有分别检测DPP4、SCG5和CA12基因的表达量的引物，所述的引物的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。

其中，所述的试剂盒较佳的还含有检测内参基因GAPDH表达量的引物，该引物的序列较佳的分别如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示。

其中，所述的试剂盒较佳的还含有PCR反应液。所述的PCR反应液更佳的含荧光染料SYBR Green、Taq酶、dNTP和镁离子。

其中，所述的引物可以是粉末，也可以是溶液。较佳的，所述的引物的浓度可以是5-15μM，更佳的是10μM。

其中，所述的试剂盒较佳的还含有抽提RNA的试剂。其为常规的抽提RNA的试剂。

其中，所述的试剂盒较佳的还含有反转录试剂。其为常规的反转录试剂。

其中，所述的试剂盒较佳的还含有双蒸水。

其中，所述的试剂盒较佳的还含有使用说明书。

本发明的一较佳实施例是：一种预测甲状腺肿瘤良恶性的荧光定量PCR试剂盒，其含有：

序列分别如SEQ ID NO.1-8所示的引物，和

含荧光染料SYBR Green、Taq酶、dNTP和镁离子的PCR反应液。

在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。