[发明专利]RNA核滞留载体的构建及应用

权利要求书

1.一种RNA表达载体，由pZW1质粒改造获得，所述RNA表达载体为在pZW1的EGFP序列的多克隆位点区域插入5’至3’方向依次排列的SNORD116-13片段、SNORD116-14片段所获得，所述多克隆位点区域为所述EGFP序列的内含子区域，所述RNA表达载体的序列如SEQ ID NO.8所示。

2.根据权利要求1所述的RNA表达载体，其特征在于，所述SNORD116-13片段的插入位点为XhoI酶切位点和EcoRI酶切位点之间，所述SNORD116-14片段的插入位点为EcoR I酶切位点和SacII酶切位点之间。

3.根据权利要求1所述的RNA表达载体，其特征在于，所述pZW1的EGFP序列如SEQ ID NO.1所示。

4.根据权利要求1所述的RNA表达载体，其特征在于，所述SNORD116-13片段的序列如SEQ ID NO.2所示。

5.根据权利要求1所述的RNA表达载体，其特征在于，所述SNORD116-14片段的序列如SEQ ID NO.3所示。

6.根据权利要求1所述的RNA表达载体的构建方法，其特征在于，所述方法为：通过PCR的方法在所述SNORD116-13片段和SNORD116-14片段的两端添加酶切位点序列，采用酶切、连接的方法将所述SNORD116-13片段和SNORD116-14片段插入pZW1质粒载体，筛选、鉴定连接正确的连接产物为所述RNA表达载体。

7.根据权利要求1-6任一权利要求所述的RNA表达载体的用途，是用于将外源表达的RNA滞留在细胞核内进行过表达。

8.一种将外源表达的RNA滞留在细胞核中的方法，其特征在于，所述方法是将外源表达的RNA序列插入权利要求1-6任一项所述RNA表达载体的多克隆位点区域，通过所述RNA表达载体表达外源的RNA并滞留在细胞核中。