[发明专利]一种与培养基分离的固体活性虫草菌丝体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及保健食品生产领域，尤其涉及一种与培养基分离的固体活性虫草菌丝体的制备方法

背景技术

随着人们生活水平的日益提高，社会活动频率的不断加快，社会各界成功人士和广大中青年工作者负荷进一步加大，中老年人和部分少年儿童急需改善和增强体质，为此研制高级天然营养保健食品成为一个急待开发的重要领域。

冬虫夏草为我国具有悠久药用历史的滋补强壮名贵中药，近代药理药化研究表明其含有腺苷、甘露醇及人体必须的18种氨基酸和富含多种有益于身体健康的微量元素，具有降血脂、防治动脉硬化、扩张血管、保护心脑组织、镇静安神、增强巨噬细胞、提高免疫功能、抑制小鼠艾氏腹水癌、抗炎、抗菌、耐缺氧的良好作用。

由于天然虫草有其严格的寄生性及特殊的生长环境，加之近年来生态环境的严重破坏，天然虫草资源锐减，价格猛涨。随着人民生活水平的不断提高，对虫草的需求量正日益增大，因此，人工培养虫草菌丝体替代天然虫草成为当务之急。现代科学研究表明，虫草菌丝体中大部分有效成分的含量基本与天然冬虫夏草相同，虫草菌丝体同样具有提高人体免疫力、抗疲劳、预防心脑血管疾病及抗肿瘤等多种促进人体健康的功能，产品保健功效显著，是天然冬虫夏草理想的替代品，有广阔的发展前景。

但是，目前虫草菌丝体难以工业化大规模生产，目前所公开的人工虫草菌丝体的制备方法中一方面普遍具有菌丝体含量低的缺点，菌丝体与培养基的质量比约为1∶61，且含量不稳定；另一方面普遍存在虫草菌丝体与培养基不易完全分离，且分离的工艺方法非常复杂，一方面影响虫草菌丝体的生物活性，另一方面影响虫草菌丝体的纯度和口感，且大大增加虫草菌丝体的生产成本。

发明内容

本发明的目的是针对一般虫草菌丝体制备方法的不足，提供一种与培养基分离的固体活性虫草菌丝体的制备方法，本发明经过将含有虫草菌丝的发酵产物进行一定条件的分离培养，使虫草菌丝体在生长过程中自然与分离培养基分离，从而得到纯的固体活性虫草菌丝体，省略一般虫草菌丝体人工制备中的分离纯化工艺，降低生产成本，更加适合大规模工业化生产，而且最大可能的保留并提高虫草菌丝体的生物活性，提高产品的药用保健功效。

本发明的另一个目的是，通过在对虫草菌种的筛选、驯化过程中采取一定的温差及光照刺激培养，得到优良的，性状稳定的虫草菌种，有利于虫草菌种的后期培养。

本发明的又一个目的是，通过在虫草菌种进行液体培养的营养液中添加一定的微量元素，使虫草菌丝体的产量得到大幅度提高。

本发明的技术方案为：

一种与培养基分离的固体活性虫草菌丝体的制备方法，包括以下步骤：

将含有虫草菌丝的发酵产物低温出罐后分装到装有一定分离培养基的分装器皿中进行暗培养，培养至有虫草菌丝体长出并与所述分离培养基分离，其中所述分离培养基包含下列重量份的组分：葡萄糖8-12，豆粕1-3及无菌水800-1200；

此外，还包括以下步骤：

步骤一、虫草菌种的筛选，将虫草菌丝接种于蚕蛹，通过自然培育法进行培育，在经过一定条件的温差和光照刺激后，选取优良虫草菌株作为虫草菌种，并将虫草菌种继续培养至孢子成熟；

步骤二、虫草菌种的驯化，将孢子成熟的虫草菌种的子囊部位组织悬于装有一定浓度生理盐水的组织培养瓶顶部，进行一定条件的光照培养后将生理盐水转接液体培养基进行液体培养，得到性状稳定的虫草菌株；

步骤三、发酵培养，将所得到的性状稳定的虫草菌株逐级扩大培养后，接种发酵罐进行一定时间的变温好氧发酵，得到含有虫草菌丝的发酵产物。

优选的是，所述的与培养基分离的固体活性虫草菌丝体的制备方法中，步骤三中发酵所用培养基包含下列重量份的组分：土豆粉8-12，蛋白胨2-4，葡萄糖20-30及无菌水800-1200；

所述变温好氧发酵的发酵条件为：充氧量8.5-9.0ppm，15-17度培养2-3天后，继续于18-19度培养1-2天，然后于19-21度培养3-5天。

优选的是，所述的与培养基分离的固体活性虫草菌丝体的制备方法中，步骤四中所述发酵产物与分离培养基的重量比为1∶13-18，所述分装器皿的装量为总容积的16-18％，分装完成后于20-24度进行暗培养35-40天。