[发明专利]一种含有长节段纤维的胶原蛋白

说明书

技术领域

本发明涉及一种含有长节段纤维的胶原蛋白，其中含有长度不低于240nm的胶原纤维。

背景技术

胶原蛋白是多细胞动物体内分布最广、含量最多的一种结构蛋白，在动物体内起着广泛的承载作用，并表现出优异的力学性能。但人工提取的胶原由于各种原因，其纤维的长度过短，且排列比较散乱，目前虽被大量地应用于相关的医用材料和组织工程材料中，其力学性能却表现不佳，直接影响了材料的力学性质，尽管人们通过多种交联手段对其进行改造，但最终材料的表现仍难尽如人意，我们通过对酶解部分条件的改变，从而保留了很多长节段纤维，使胶原蛋白的力学性能有了很大的提高，可广泛应用于骨、肌腱、皮肤、血管等组织工程材料中，使其力学性能得以改善。

发明内容

本发明的目的是提供一种含有生理盐的胶原海绵产品。其步骤如下：

1、取预处理并捣碎的动物皮或跟腱100g，置于2000～5000ml浓度为5mmol/L～0.5mol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制温度为0～10℃，缓慢加入浓度为1～10mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，边加边搅拌，直至胶原溶液全部变成白色乳液为止；

2、将温度升至20～35℃，10分钟内搅拌至溶液中不均匀沉淀消失，加入比活性为1∶10000的胃蛋白酶300mg，继续搅拌均匀；

3、将温度重新调整为0～10℃，继续恒温60～70小时，离心取上清液，盐析透析后，冻干为成品；

具体实施方式

实施例一

预处理并捣碎的牛皮100g，置于2000ml浓度为5mmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制温度为0℃，缓慢加入浓度为1mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，边加边搅拌，直至胶原溶液全部变成白色乳液。升温至28℃，10分钟内搅拌至溶液中不均匀沉淀消失，加入比活性为1∶10000的胃蛋白酶300mg，继续搅拌均匀。降温度至0℃，继续恒温68小时，离心取上清液，盐析透析后，冻干为成品。

实施例二

预处理并捣碎的牛腱100g，置于5000ml浓度为10mmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制温度为10℃，缓慢加入浓度为5mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，边加边搅拌，直至胶原溶液全部变成白色乳液。升温至30℃，10分钟内搅拌至溶液中不均匀沉淀消失，加入比活性为1∶10000的胃蛋白酶300mg，继续搅拌均匀。降温度至10℃，继续恒温60小时，离心取上清液，盐析透析后，冻干为成品。

实施例三

预处理并捣碎的猪皮100g，置于3500ml浓度为50mmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制温度为5℃，缓慢加入浓度为10mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，边加边搅拌，直至胶原溶液全部变成白色乳液。升温至25℃，10分钟内搅拌至溶液中不均匀沉淀消失，加入比活性为1∶10000的胃蛋白酶300mg，继续搅拌均匀。降温度至5℃，继续恒温70小时，离心取上清液，盐析透析后，冻干为成品。

实施例四

预处理并捣碎的猪跟腱100g，置于4000ml浓度为0.1mol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制温度为3℃，缓慢加入浓度为8mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，边加边搅拌，直至胶原溶液全部变成白色乳液。升温至20℃，10分钟内搅拌至溶液中不均匀沉淀消失，加入比活性为1∶10000的胃蛋白酶300mg，继续搅拌均匀。降温度至2℃，继续恒温69小时，离心取上清液，盐析透析后，冻干为成品。

实施例五

预处理并捣碎的牛跟腱100g，置于4500ml浓度为0.5mol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制温度为8℃，缓慢加入浓度为3mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，边加边搅拌，直至胶原溶液全部变成白色乳液。升温至22℃，10分钟内搅拌至溶液中不均匀沉淀消失，加入比活性为1∶10000的胃蛋白酶300mg，继续搅拌均匀。降温度至8℃，继续恒温65小时，离心取上清液，盐析透析后，冻干为成品。